MIA2慢病毒表达载体构建及其表达活性的研究

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目的构建黑色素瘤抑制蛋白2(MIA2)慢病毒表达载体,并将其通过脂质体转染到HepG2细胞中,观察转染前后MIA2表达变化及其对细胞凋亡的影响。方法以pDONR223-MIA2为模板,PCR扩增MIA2,构建pLVX-IRES-ZsGreen1-MIA2慢病毒表达载体,体外瞬时转染肝癌细胞HepG2,荧光显微镜下观察MIA2的表达情况,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HepG2细胞中MIA2mRNA的表达情况,噻唑蓝(MTT)法和克隆形成实验检测细胞增殖的情况。结果成功构建pLVXIRES-ZsG
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