【摘 要】
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目的 以真核表达质粒pCMVβ为报告基因,研究用芳香族氨基酸合成缺陷的沙门菌SL7207为载体以提高DNA疫苗免疫应答的可行性.方法携带质粒pCMVβ的SL7207体外感染小鼠腹腔巨噬细胞后,用X-gal染色方法和RT-PCR方法检测巨噬细胞内β-gal的表达.小鼠口服免疫SL7207(pCMVβ)后,用RT-PCR方法检测β-gal基因在淋巴组织中的转录产物;用ELISA方法检测体液免疫;用3H
【机 构】
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200025,上海第二医科大学微生物教研室,200025,上海第二医科大学微生物教研室,200025,上海第二医科大学微生物教研室,200025,上海第二医科大学微生物教研室,200025,上海第二医
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目的 以真核表达质粒pCMVβ为报告基因,研究用芳香族氨基酸合成缺陷的沙门菌SL7207为载体以提高DNA疫苗免疫应答的可行性.方法携带质粒pCMVβ的SL7207体外感染小鼠腹腔巨噬细胞后,用X-gal染色方法和RT-PCR方法检测巨噬细胞内β-gal的表达.小鼠口服免疫SL7207(pCMVβ)后,用RT-PCR方法检测β-gal基因在淋巴组织中的转录产物;用ELISA方法检测体液免疫;用3H-TdR掺入法检测脾淋巴细胞增殖;用JAM试验检测杀伤性T淋巴细胞反应.结果 SL7207能有效地将质粒DNA传递到体外培养的巨噬细胞中并进行表达;小鼠口服携带有pCMVβ的SL7207后,能在脾脏、派伊尔结、肠系膜淋巴结中检测到目的基因的转录,并可诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫.与肌内注射pCMVβ相比较,口服SL7207(pCMVβ)能更有效地诱导出细胞免疫应答.结论减毒沙门菌SL7207作为DNA疫苗的载体,可经口服途径进行免疫,并可将质粒直接传递给抗原递呈细胞,诱导出以细胞免疫为主的免疫应答。
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