草甘膦胶体金免疫层析试纸条的研制

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基于竞争抑制免疫层析原理,开展茶叶中草甘膦快速检测试纸条的研制。采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了20 nm胶体金颗粒,然后以胶体金为标记物制备草甘膦单克隆抗体-胶体金偶联物,以硝酸纤维素膜为固相载体,包被草甘膦半抗原-卵清蛋白偶联物为检测线、羊抗兔二抗为质控线,建立草甘膦的胶体金快速检测试纸条。同时优化了胶体金最适pH值、抗体最佳使用量、试纸条材料的型号,最终确定胶体金溶液的pH值为7.5,最佳抗体使用量为3.0 μL,硝酸纤维素膜(NC膜)的型号为CN140,胶体金结合垫(金标垫)的型号为GL-b01,样品垫的型号为GS12。通过该方法得到的试纸条对茶叶中草甘膦的检测限为0.50 mg/kg,满足国家标准对茶叶中草甘膦最大残留限量的要求,且对异菌脲、多菌灵、三唑磷、甲基对硫磷、噻菌灵均未产生交叉反应,特异性良好。该方法操作简便,检测时间仅10 min,重复性高、稳定性好,适用于茶叶中草甘膦残留的现场筛查和检测。
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