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目的
观察A20基因表达下调对鼻咽癌细胞体内外增殖、侵袭及转移能力的影响。
方法筛选并建立Tet－on基因表达系统诱导A20沉默的鼻咽癌肝转移亚系5－8F－H3细胞系，实时荧光定量PCR、Western印迹检测干扰效率；CCK8法、平板克隆形成实验检测A20对5－8F－H3增殖能力的影响；流式细胞仪检测细胞周期；侵袭小室检测A20对5－8F－H3侵袭能力的影响；裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验检测经强力霉素(DOX)诱导A20基因表达沉默对5－8F－H3在体内增殖及转移能力的影响。
结果可诱导沉默A20的鼻咽癌细胞5－8F－H3/A20－shRNA构建成功。5－8F－H3/A20－shRNA经DOX诱导后，A20基因mRNA及蛋白的表达均下调(均P<0.01)；CCK8法(F＝18.542，P＝0.003)、平板克隆形成实验(F＝40.080，P<0.001)及流式细胞术检测实验(F＝7.398，P＝0.024)结果显示A20基因表达下调明显抑制5－8F－H3在体外增殖能力；侵袭小室检测结果显示A20基因表达下调抑制5－8F－H3在体外侵袭能力(F＝26.157，P<0.001)。裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验结果显示A20基因表达下调明显抑制5－8F－H3在裸鼠体内的成瘤和转移能力。
结论A20与鼻咽癌多种恶性生物学行为密切相关，有望成为鼻咽癌潜在治疗靶点。