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检测方法及正常参考值范围
检测PCT较特异与敏感的分析方法:双抗夹心免疫化学发光法(双抗夹心法)和放射免疫分析法(RIA)。
双抗夹心法运用双单克隆抗体,其一作为捕获抗体,直接结合PCT96-106氨基酸残基,即未成熟CT:CCP-1部分,另一作为示踪抗体,直接结合PCT70~76氨基酸残基,即未成熟CT分子,人工合成的PCT作为标准。该方法比较特异,无交叉反应,其检测最低浓度为10pg/ml,标准曲线线性范围为10~60pg/ml。批内、批间变异系数分别为7%和8%。该法已有相应商品试剂,所需时间较短,易自动化,但不能检测到正常人血清中PCT。
RIA使用一种对人工合成的aminoPCT特异的多克隆抗体RIB7。RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分,故RIA既能检测游离的PCT,又能检测结合型的PCT,也可检测降钙素基因相关前体(Pro-CGRP)。此法可信的敏感度为4pg/m[1]。线性范围10~77pg/ml,50%的结合游离比为140pg/ml。该法能检测正常人血清PCT,故较双抗夹心法敏感;另一优点是RIA与病程呈正相关(r=0.47,P=0.071)。RIA缺点是所需时间较长。
PCT检测的临床应用
血液肿瘤科:PCT有助于对细菌和真菌引起的系统性感染作出明确诊断。即使是化疗患者,PCT对是否有败血症感染也能作出可靠的检测和评估。PCT在免疫抑制和中性粒细胞减少患者中的表现与无免疫抑制患者中观察的结果相似,其诊断价值已明显优于CRP和细胞因子。骨髓移植或造血干细胞移植患者,均存在体液和细胞免疫缺陷,可掩盖因细菌、真菌、病毒及原虫引起的严重系统性感染。PCT浓度的升高对细菌性全身感染有很高的诊断率。如果同種异体移植后出现败血症休克,血浆PCT浓度极度升高,表明预后不良。
麻醉科:中小手术血浆PCT浓度通常在正常范围内;大手术如大的腹部手术或胸部手术,术后1~2天内PCT浓度常升高,通常为0.5~2.0ng/ml,偶尔超过5ng/ml(这种情况常以24小时为半衰期,几天内降至正常水平)。因此术后因感染造成的PCT高浓度或持续高水平很容易鉴别。复合创伤后12~24小时,PCT中度升高,可达2.0ng/ml,严重的肺或胸部创伤,PCT可达5ng/ml,如没有感染并发症,一般以半衰期速度降至正常范围[2]。
内科:PCT选择性地对系统性细菌感染、相似菌感染及原虫感染有反应,而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。因此,PCT适用于内科医疗中常见的疾病和综合征的鉴别诊断,如:成人呼吸窘迫综合征感染性和非感染性病因学的鉴别诊断;胰腺炎感染坏死和无菌性坏死的鉴别诊断;鉴定感染时发热,如接受化疗的肿瘤和血液病患者;在接受免疫抑制剂的患者中,鉴别诊断慢性自身免疫性疾病的急性恶化与风湿性疾病伴系统性细菌感染;鉴别诊断细菌性脑膜炎与病毒性脑膜炎;对接受化疗的中性粒细胞低下症患者,明确是否存在有生命危险的细菌和真菌感染;对接受免疫抑制疗法的器官移植患者,明确是否存在严重的细菌和真菌感染,同时用于感染和移植排斥反应的鉴别诊断。
移植外科:器官移植患者使用PCT检测,可早期引入治疗从而提高生存率并缩短住院时间。PCT用于器官移植患者感染的诊断,免疫抑制疗法严重削弱了器官移植患者的抗感染能力,而PCT可早在感染发生仅2小时即可提示有系统性感染的存在。感染早期PCT>0.1ng/ml,其灵敏度77%,特异性100%,逐月的PCT浓度监测可对抗微生物疗法的疗效作出可靠的评价[3]。PCT应用于器官排斥反应、器官移植后监测的主要任务之一,就是能明确区分感染与器官排斥。因为PCT的释放不是由急性或慢性器官排斥反应刺激引起的,所以若存在高浓度的PCT即可认为有感染存在。如果PCT浓度超过10ng/ml,98%可能是感染而非器官排斥。
新生儿科:与其他炎症诊断指标相比,PCT是一种改进的实验室指标,它对新生儿出生后败血症的诊断具有高度的灵敏度和特异性。PCT也可用于对治疗结果的评价。早产儿和新生儿PCT年龄依赖性正常值:PCT于出生后24~30小时达其生理性高峰21ng/ml,但平均值仅为2ng/ml。出生后第3天起,PCT正常参考值同成人。PCT是新生儿败血症高度特异性的指标:早产儿和新生儿败血症感染,PCT可作出较传统方法更早、更特异性的诊断,它对新生儿诊断的灵敏度和特异性可达100%。
儿科:PCT对细菌和病毒感染的鉴别诊断有很高的灵敏度和特异性。由于细菌感染和病毒感染治疗上存在本质性的差别,因此PCT对具有非特异性感染症状的患者的治疗可提供有价值的信息。高浓度的PCT只出现于细菌性脑膜炎;而病毒性脑膜炎PCT仍保持在正常范围内(脑脊液中检测不到PCT)。每天按时对PCT浓度进行监测,可对治疗结果作出可靠的评价。
外科:术后PCT的应用,PCT与严重细菌和败血症感染的发生及其过程有密切的关系,能准确反映引起病变(如腹膜炎)的感染源是否得到根除。每天对PCT浓度进行监测,可对治疗结果做出可靠的评价。PCT可用于手术创伤或复合创伤的监测。PCT用于心脏手术患者,心脏手术使用心肺机,即使患者有白细胞增多症、中性粒细胞增多症、嗜酸性细胞减少症或CRP升高不充分等疾病,PCT浓度通常不升高或仅有轻微升高,故PCT很适合用于败血症的检测。
参考文献
1 Oberhoffer M,Stonans I,Russwurm S,et al.Procalcitonin expression in Human PeriPheral blood mononuclear cells and its mudalution by lipopolysaccharides and sepsis related cytokines in vitro.J Lab Clin Med,1999,134:49.
2 Michael Meisner.Procalcitonin-A new marker of severe infection and sepsis.Thleme,2000,179.
3 Hergert M,Kestln HG,Scherkus,et al.Procalcitonin in patients with the ACCP/SCCM consensus definitions than other specific markers of the inflammatory polytrauma.Clin Lab,1998,44:659.
检测PCT较特异与敏感的分析方法:双抗夹心免疫化学发光法(双抗夹心法)和放射免疫分析法(RIA)。
双抗夹心法运用双单克隆抗体,其一作为捕获抗体,直接结合PCT96-106氨基酸残基,即未成熟CT:CCP-1部分,另一作为示踪抗体,直接结合PCT70~76氨基酸残基,即未成熟CT分子,人工合成的PCT作为标准。该方法比较特异,无交叉反应,其检测最低浓度为10pg/ml,标准曲线线性范围为10~60pg/ml。批内、批间变异系数分别为7%和8%。该法已有相应商品试剂,所需时间较短,易自动化,但不能检测到正常人血清中PCT。
RIA使用一种对人工合成的aminoPCT特异的多克隆抗体RIB7。RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分,故RIA既能检测游离的PCT,又能检测结合型的PCT,也可检测降钙素基因相关前体(Pro-CGRP)。此法可信的敏感度为4pg/m[1]。线性范围10~77pg/ml,50%的结合游离比为140pg/ml。该法能检测正常人血清PCT,故较双抗夹心法敏感;另一优点是RIA与病程呈正相关(r=0.47,P=0.071)。RIA缺点是所需时间较长。
PCT检测的临床应用
血液肿瘤科:PCT有助于对细菌和真菌引起的系统性感染作出明确诊断。即使是化疗患者,PCT对是否有败血症感染也能作出可靠的检测和评估。PCT在免疫抑制和中性粒细胞减少患者中的表现与无免疫抑制患者中观察的结果相似,其诊断价值已明显优于CRP和细胞因子。骨髓移植或造血干细胞移植患者,均存在体液和细胞免疫缺陷,可掩盖因细菌、真菌、病毒及原虫引起的严重系统性感染。PCT浓度的升高对细菌性全身感染有很高的诊断率。如果同種异体移植后出现败血症休克,血浆PCT浓度极度升高,表明预后不良。
麻醉科:中小手术血浆PCT浓度通常在正常范围内;大手术如大的腹部手术或胸部手术,术后1~2天内PCT浓度常升高,通常为0.5~2.0ng/ml,偶尔超过5ng/ml(这种情况常以24小时为半衰期,几天内降至正常水平)。因此术后因感染造成的PCT高浓度或持续高水平很容易鉴别。复合创伤后12~24小时,PCT中度升高,可达2.0ng/ml,严重的肺或胸部创伤,PCT可达5ng/ml,如没有感染并发症,一般以半衰期速度降至正常范围[2]。
内科:PCT选择性地对系统性细菌感染、相似菌感染及原虫感染有反应,而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。因此,PCT适用于内科医疗中常见的疾病和综合征的鉴别诊断,如:成人呼吸窘迫综合征感染性和非感染性病因学的鉴别诊断;胰腺炎感染坏死和无菌性坏死的鉴别诊断;鉴定感染时发热,如接受化疗的肿瘤和血液病患者;在接受免疫抑制剂的患者中,鉴别诊断慢性自身免疫性疾病的急性恶化与风湿性疾病伴系统性细菌感染;鉴别诊断细菌性脑膜炎与病毒性脑膜炎;对接受化疗的中性粒细胞低下症患者,明确是否存在有生命危险的细菌和真菌感染;对接受免疫抑制疗法的器官移植患者,明确是否存在严重的细菌和真菌感染,同时用于感染和移植排斥反应的鉴别诊断。
移植外科:器官移植患者使用PCT检测,可早期引入治疗从而提高生存率并缩短住院时间。PCT用于器官移植患者感染的诊断,免疫抑制疗法严重削弱了器官移植患者的抗感染能力,而PCT可早在感染发生仅2小时即可提示有系统性感染的存在。感染早期PCT>0.1ng/ml,其灵敏度77%,特异性100%,逐月的PCT浓度监测可对抗微生物疗法的疗效作出可靠的评价[3]。PCT应用于器官排斥反应、器官移植后监测的主要任务之一,就是能明确区分感染与器官排斥。因为PCT的释放不是由急性或慢性器官排斥反应刺激引起的,所以若存在高浓度的PCT即可认为有感染存在。如果PCT浓度超过10ng/ml,98%可能是感染而非器官排斥。
新生儿科:与其他炎症诊断指标相比,PCT是一种改进的实验室指标,它对新生儿出生后败血症的诊断具有高度的灵敏度和特异性。PCT也可用于对治疗结果的评价。早产儿和新生儿PCT年龄依赖性正常值:PCT于出生后24~30小时达其生理性高峰21ng/ml,但平均值仅为2ng/ml。出生后第3天起,PCT正常参考值同成人。PCT是新生儿败血症高度特异性的指标:早产儿和新生儿败血症感染,PCT可作出较传统方法更早、更特异性的诊断,它对新生儿诊断的灵敏度和特异性可达100%。
儿科:PCT对细菌和病毒感染的鉴别诊断有很高的灵敏度和特异性。由于细菌感染和病毒感染治疗上存在本质性的差别,因此PCT对具有非特异性感染症状的患者的治疗可提供有价值的信息。高浓度的PCT只出现于细菌性脑膜炎;而病毒性脑膜炎PCT仍保持在正常范围内(脑脊液中检测不到PCT)。每天按时对PCT浓度进行监测,可对治疗结果作出可靠的评价。
外科:术后PCT的应用,PCT与严重细菌和败血症感染的发生及其过程有密切的关系,能准确反映引起病变(如腹膜炎)的感染源是否得到根除。每天对PCT浓度进行监测,可对治疗结果做出可靠的评价。PCT可用于手术创伤或复合创伤的监测。PCT用于心脏手术患者,心脏手术使用心肺机,即使患者有白细胞增多症、中性粒细胞增多症、嗜酸性细胞减少症或CRP升高不充分等疾病,PCT浓度通常不升高或仅有轻微升高,故PCT很适合用于败血症的检测。
参考文献
1 Oberhoffer M,Stonans I,Russwurm S,et al.Procalcitonin expression in Human PeriPheral blood mononuclear cells and its mudalution by lipopolysaccharides and sepsis related cytokines in vitro.J Lab Clin Med,1999,134:49.
2 Michael Meisner.Procalcitonin-A new marker of severe infection and sepsis.Thleme,2000,179.
3 Hergert M,Kestln HG,Scherkus,et al.Procalcitonin in patients with the ACCP/SCCM consensus definitions than other specific markers of the inflammatory polytrauma.Clin Lab,1998,44:659.