以潮霉素抗性为选择标记的稻瘟病菌原生质体转化

来源 :遗传学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scorpiokyan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
稻瘟病菌对潮霉素(HygromycinB,简写为HmB)较为敏感,当不含无机盐的再生培养基中HmB浓度达到100μg/ml时,稻瘟病菌2539w原生质体的再生即被完全抑制。我们利用带有HmB抗性基因的质粒(pAN7-1),通过PEG②融合法对其原生质体进行转化,获得了HmB抗性转化子。转化子以两类形式出现:一类为大而生长稳定的菌落,另一类为小而生长不稳定的菌落,两类菌落产生频率分别为每μgDNA3-4个和10-20个。将大菌落转化子转接到含有HmB的新培养基上,仍可正常生长,但小菌落转化子却不能,说明前者为真正的转化子而后者为流产转化子。DNA杂交分析显示转化是由于质粒DNA整合到了2539w的染色体DNA上,整合可在染色体DNA的不同位点上发生。受试的7个转化子尽管各自的整合形式不同,但均在选择与非选择性培养中保持稳定。 Magnaporthe grisea was more sensitive to hygromycin B (HmB). When the concentration of HmB in the medium without inorganic salts reached 100μg / ml, the regeneration of 2539w protoplasts of Magnaporthe grisea was completely inhibited. We transformed the protoplasts by PEG2 fusion using the plasmid with the HmB resistance gene (pAN7-1), and obtained HmB resistant transformants. Transformants appeared in two forms: one for large and stable colonies, the other for small and unstable colonies, with two colonies producing frequencies of 3-4 and 10-20 per μg of DNA, respectively. The large colony transformants were transferred to the new medium containing HmB, can still grow normally, but small colony transformants can not, that the former is a true transformant and the latter abortion transformants. DNA hybridization analysis shows that the transformation is due to the integration of the plasmid DNA into the 2539w chromosomal DNA, which can occur at different sites on the chromosomal DNA. The seven transformants tested remained stable in both selective and non-selective cultures despite their different forms of integration.
其他文献
财政监督是一个具有广泛内涵的概念。财政部门作为宏观经济综合管理部门,既对本级政府、下级政府所属各部门,以及国有企业(包括国家控股企业)、事业单位实施财政监督,而又受制于其
目的 :研究重组人骨形成蛋白 2 (rhBMP2 )诱导小鼠颅神经嵴细胞 (CNCC)分化后所产生的神经元类型是否为肾上腺能神经元。方法 :用 5 0ng/mlrhBMP2 诱导CNCC分化为神经元。提
丹参酮Ⅱ_A是丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)中含量较高的一种有效成分,系为酯溶性成分。经磺化后成为水溶性化合物,可作静脉给药,治疗冠心病等。 为探讨丹参酮Ⅱ_A磺酸钠
复乳(Multiple Emulsion)是由普通单乳进一步乳化而成的复杂乳剂体系,常见的有W/O/W 型与O/W/O 型等几类。前者由油包水型(W/O)初乳经再乳化而分散于水相所得;后者由水包油
鏈球菌溶血素O具有較强的抗元性,当机体遭受溶血性鏈球菌感染时,可产生对抗溶血素O的特異性抗体。目前,血清抗鏈球菌溶血素O的测定已广泛应用于风湿病、急性腎炎等与鏈球菌
著者均任教于国立清华大学有年,感有机定 性分析中所用试验,有价值昂贵购买不易者, 设法自制之,本篇之作,亦因制取困时 而希有以改善其制法者,特述缘起于此,以示 其初旨耳。 Author
棉花烂铃综防技术1合理追肥:棉株长势旺的要晚施,少施肥。避免偏施氮肥,合理增施磷钾肥。8月中旬至9月上旬,可用磷酸二氢钾根外追肥,促使棉铃早开裂。2整枝摘叶:对生长过旺的棉田,应
乡镇财政是我国最基层的财政组织,是实施财政振兴战略的重要组成部份。由于乡镇财政建立时间不长,在发展和管理方面,没有引起足够重视,使许多问题未能切实解决。为了巩固乡镇财权
微型胶囊 Microcapsules 简称微囊,就是将固体、液体或混悬物的微小颗粒(称囊心物质)的周围包上一层薄膜(称包料)形成极为微小的胶囊,其直径从零点几微米(μ)至5,000微米。
<正> 乙酰唑胺(Acetazolamide,商业名称 Diamox),CH3—CONH—C C—SO2NH2(?)为近年来所发现的新型非汞利尿剂.该药作用机制与一般常用利尿剂不同,能借抑制碳酸脱水酶而发挥利尿作