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目的
探索外周血标本在结直肠癌患者KRAS基因突变检测中的价值以及循环肿瘤细胞个数与KRAS基因突变检测的相关性。
方法收集江南大学附属医院2013年至2014年结直肠癌石蜡切片及对应的外周血标本各112例,另外收集10例肠炎外周血标本作为对照。运用扩增受阻突变体系法检测上述标本的KRAS基因突变状况,同时,运用免疫荧光原位杂交技术检测外周血样本及肠炎对照标本中循环肿瘤细胞的数目。
结果在112例结直肠癌中,石蜡包埋切片有46例发现了KRAS基因的突变(41.1%);外周血中,有25例发现了KRAS基因的突变(22.3%),差异有统计学意义(χ2=40.12,P<0.001)。但其中1例在石蜡包埋切片的检测中为野生型,而在外周血标本的检测中为突变型;另1例标本的KRAS基因突变位点在两种不同的样本中检测结果不同。当肿瘤细胞个数>15时,其检测的敏感性为73.3%,而循环肿瘤细胞个数在5~15之间时,其检测敏感性为41.9%,循环肿瘤细胞个数为1~5时,检测敏感性仅为16.7%,差异有统计学意义(χ2=23.70,P<0.001)。10例肠炎标本均未检测到外周血循环肿瘤细胞,也未检测到KRAS基因的突变。
结论以外周血为标本进行KRAS基因检测具备良好的特异性,准确率欠佳。当患者不具备手术条件时,可作为结直肠患者KRAS基因检测的一种选择性方法。外周血中循环肿瘤细胞的个数越多,KRAS基因突变检测的敏感性越高。