人纤溶酶原K5基因的结构改造及其在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定

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目的 改造人纤溶酶原Kringle 5(K5)基因,构建RGDRGD—liteK5融合表达质粒,并表达纯化所得RGDRGD—liteK5蛋白。方法以人纤溶酶原K5cDNA为模板,通过PCR得到RGDRGD—liteK5基因片段,并克隆到质粒pGEX1-λT中,构建重组原核融合表达载体pGEX—RGDRGD—liteK5;在IPTG诱导下,观察融合蛋白在大肠杆菌Rosetta中的表达情况;利用亲合层析柱纯化表达产物,用Westernblot分析鉴定表达产物。结果PCR扩增得到274bp的片段,并成功插入pG
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