【摘 要】
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本文建立了一种快速、灵敏、准确、可靠的LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中奥贝胆酸浓度,并应用于奥贝胆酸大鼠灌胃给药后的药动学研究。血浆样品以甲基叔丁基醚提取后,经ACE
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金资助项目(81503154)
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本文建立了一种快速、灵敏、准确、可靠的LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中奥贝胆酸浓度,并应用于奥贝胆酸大鼠灌胃给药后的药动学研究。血浆样品以甲基叔丁基醚提取后,经ACE Excel 2 Super C18色谱柱（50 mm×2.1 mm ID,1.7μm）分离,以乙腈-2 mmol·L-1甲酸铵水溶液（含10%乙腈）作为流动相,梯度洗脱,流速0.2 m L·min-1。电喷雾离子化源（ESI）负离子条件下,采用多反应监测模式（MRM）进行定量分析,监测离子对分别为奥贝胆酸m/z 418.9[M-H]-→401.2,内标甘草次酸m/z 469.0[M-H]-→425.2。大鼠血浆中奥贝胆酸在55 000 ng·m L-1浓度内线性关系良好（r2?0.99）,定量下限为5 ng·m L-1;日内、日间精密度（RSD）小于9.82%,准确度（RE）在±6.90%以内;血浆中无内源性物质干扰,内标归一化后的基质效应为78.9%82.5%,提取回收率为85.4%88.5%;奥贝胆酸的血浆样品经室温放置24 h、-70℃3次冻融循环、-70℃冻存1个月,处理后的样品在进样器内放置24 h均稳定;药物浓度超出曲线范围的样品经空白血浆稀释10倍后,其准确度在±11.2%以内,精密度为7.25%。本方法经验证后,成功应用于大鼠灌胃给予奥贝胆酸后的药动学研究。
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