不同流加发酵方式对重组大肠杆菌细胞外hEGF表达水平的影响

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人表皮生长因子(hEGF)是由53个氨基酸组成的单链多肽,内有3个二硫键.它具有多种重要的生物学功能,能够促进表皮细胞的生长繁殖,加速皮肤和角膜创伤的修复,加速胃溃疡的治疗和抑制胃酸的分泌,具有广阔的医疗应用前景[1].最近又发现hEGF在化妆品产业中有潜在的重大应用[2].这些都促进了人们试图采用基因工程技术大规模地生产hEGF.1982年Smith等人首先在E.coli中以融合蛋白形式实现了hEGF的表达[3],随后在枯草杆菌和酵母菌中亦相继实现了表达[4].由于hEGF在酵母菌中表达水平很低,大肠杆菌和枯草杆菌就成了普遍应用的工程菌宿主.其中W.K.R.Wong等人构建了细胞外膜蛋白A的信号肽基因与hEGF基因融合的质粒,首次将E.coli中表达的hEGF分泌到细胞外,大大降低了hEGF纯化的难度,提高了纯化收率[5].对于这一新型的分泌型重组大肠杆菌表达系统,初步的表达条件的优化工作已在摇瓶阶段完成[6].进一步在发酵罐中考察该重组大肠杆菌的发酵行为以及不同的发酵策略的应用是该工程菌产业化的重要研究环节.
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