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摘 要 目的：探讨癌基因Bcl-2、C-fos在外阴鳞癌发生、发展中的意义。方法：采用免疫组化法对30例外阴鳞癌，40例外阴上皮内瘤变(其中VINⅠ－VINⅡ20例，VINⅢ20例)的Bcl-2、C-fos的表达情况进行检测，并与正常皮肤对照。结果：Bcl-2、C-fos在正常组织不表达，在外阴鳞癌中的表达阳性率分别为73.3％和66.7％，在VINⅢ的表达阳性率分别为55％和45％，在VINⅠ－VINⅡ的表达阳性率分别为5%和10%。外阴鳞癌表达的阳性率与癌组织分化程度有关（P<0.05）,肿瘤的分化程度越低，其表达水平越高并与淋巴结转移有关（P<0.05）。结论：Bcl-2、C-fos与外阴鳞癌的发生发展密切相关。可能是反映外阴鳞癌生物学行为和预后的重要标记物。
关键词 外阴鳞癌 Bcl-2 C-fos 免疫组织化学
我们采用S-P免疫组化方法检测Bcl-2、C-fos在外阴鳞癌组织中的表达，并探讨其在外阴鳞癌发生发展中的作用和意义。
资料与方法
材料：收集1995年1月~2005年1月于中国医科大学附属第一医院病理教研室经手术切除及活检存档的腊块。外阴鳞癌30例，高分化11例，中分化10例，低分化9例。淋巴结转移13例，无淋巴结转移17例。外阴上皮内瘤变40例，其中VINⅠ-VINⅡ共20例，VINⅢ 20例,外阴正常皮肤10例。年龄30~75岁之间。
方法：采用免疫组织化学s-p法，连续切片，厚度3μm,切片经常规脱腊，水化后，高温修复抗原，小鼠单克隆抗Bcl-2抗体为美国产品，兔抗人C-fos系福州产的多克隆抗体。一抗工作浓度为1：125，DAB染色，PBS代替一抗为阴性对照。
阳性标准：用光学显微镜检查显色反应。Bcl-2阳性时，细胞浆呈棕黄色颗粒。阳性判定标准：每张切片阳性肿瘤细胞数＜5%为阳性；＜25％为弱阳性（＋）；25％~50％为明显阳性（＋＋）；>50％强阳性（＋＋＋）。C-fos基因产物呈棕黄色颗粒分布于病变细胞核上，颜色较BcL-2为深。记录及判定标准与BcL-2相同。
統计方法：使用SPSS10.0.0统计软件，采用X2检验，p<0.05为差异有显著意义。
结 果
外阴鳞癌组织(VSCC)中Bcl-2、C-fos的阳性表达率分别为73.3％，66.7％。VINⅢ中Bcl-2、C-fos的阳性表达率分别为55％，45％。在VINⅠ-VINⅡ中的表达阳性率分别为5%，10%。正常皮肤组织中未见Bcl-2、C-fos的蛋白的表达。VSCC与VINⅢ无显著性差异（P>0.05），VINⅢ与VINⅠ－Ⅱ有显著性差异（P<0.05），VSCC与正常皮肤有显著性差异（P<0.05）（见表）。
C-fos及 C-jun蛋白的表达与外阴鳞癌病理和临床指标之间的关系：随着外阴鳞癌组织分化程度的降低，Bcl-2、C-fos蛋白的表达也随之升高，高低分化的表达程度有显著性差异（P<0.05）。有淋巴结转移的阳性率与无淋巴结转移的阳性率有显著性差异（P<0.05）。但与年龄大小无显著性差异（P>0,05）。
讨 论
Bcl-2 首先在B细胞相关的恶性肿瘤中发现，该肿瘤细胞18号染色体上的Bcl-2异位到14号染色体上，与免疫球蛋白的重链基因串联，形成融合基因，从而使Bcl-2基因在B细胞内异常表达，该基因编码由239个氨基酸组成的分子量为26KD的Bcl-2a和由205的氨基酸组成的分子量为22kd的Bcl-2β蛋白。近年来研究发现Bcl-2基因是细胞凋亡调空中的重要基因。Bcl-2基因在肿瘤发生中发挥作用不是通过加速细胞有丝分裂，而是延长其生存期。这就为肿瘤的发生及发病因素提供了积聚条件，Bcl-2抑制凋亡作用途径可能是阻止引起DNA损伤信号传导给凋亡基因。导致DNA受损的细胞持续存活，突变的产物聚集。
C-fos是核内癌基因，它定位与14号染色体上（14q），C-fos包含5个外显子，其3'末端非编码区的缺失，可使C-fos激活，C-fos是由380个氨基酸组成，是编码为55KD的核内蛋白质。当基因被激活后迅速转录mRNA然后进入胞质中，合成C-fos蛋白，之后较快地进入细胞核，调节细胞核内癌基因，所以称为核内癌基因。在细胞正常增长的情况下，如果C-fos基因过量表达，可破坏细胞生长、浸润及转移的调节，当受到非某些因素影响后，某结构表达失常，从而被激活，此时C-fos具有肿瘤转化活性。所以检测基因产物有助于从蛋白水平认识肿瘤的本质。
本研究用免疫组化方法发现，Bcl-2、C-fos蛋白在正常外阴皮肤不表达，在外阴鳞癌中的表达分别为73.3%和66.7%。在VIN Ⅲ中的表达为分别为55%和45%，表明癌基因在外阴鳞癌的发生发展有着密切的关系。同时，Bcl-2、C-fos在外阴低分化鳞癌中的表达水平明显高于高分化鳞癌（P<0.05），有淋巴结转移的阳性率明显高于无淋巴结转移的阳性率（P<0.05）于文献报道相符合，提示Bcl-2、C-fos基因是预后不良因子，其表达在外因鳞癌的转移过程中起重要作用，目前认为肿瘤的发生、发展是多基因损伤机器编码产物的协同作用结果，外阴鳞癌某些生物学特性的获得至少需几种相失基因的联合作用。我们研究提示Bcl-2、C-fos基因在外阴鳞癌发生发展过程中具有协同作用。
参考文献
1 张建中.BcL-2基因在免疫系统中的作用.国外医学分子生物学分册，1995，17（2）：52
2 王举，窦忠霞.大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义.中国普外基础与临床杂志，2002，9（4）：252~254
关键词 外阴鳞癌 Bcl-2 C-fos 免疫组织化学
我们采用S-P免疫组化方法检测Bcl-2、C-fos在外阴鳞癌组织中的表达，并探讨其在外阴鳞癌发生发展中的作用和意义。
资料与方法
材料：收集1995年1月~2005年1月于中国医科大学附属第一医院病理教研室经手术切除及活检存档的腊块。外阴鳞癌30例，高分化11例，中分化10例，低分化9例。淋巴结转移13例，无淋巴结转移17例。外阴上皮内瘤变40例，其中VINⅠ-VINⅡ共20例，VINⅢ 20例,外阴正常皮肤10例。年龄30~75岁之间。
方法：采用免疫组织化学s-p法，连续切片，厚度3μm,切片经常规脱腊，水化后，高温修复抗原，小鼠单克隆抗Bcl-2抗体为美国产品，兔抗人C-fos系福州产的多克隆抗体。一抗工作浓度为1：125，DAB染色，PBS代替一抗为阴性对照。
阳性标准：用光学显微镜检查显色反应。Bcl-2阳性时，细胞浆呈棕黄色颗粒。阳性判定标准：每张切片阳性肿瘤细胞数＜5%为阳性；＜25％为弱阳性（＋）；25％~50％为明显阳性（＋＋）；>50％强阳性（＋＋＋）。C-fos基因产物呈棕黄色颗粒分布于病变细胞核上，颜色较BcL-2为深。记录及判定标准与BcL-2相同。
統计方法：使用SPSS10.0.0统计软件，采用X2检验，p<0.05为差异有显著意义。
结 果
外阴鳞癌组织(VSCC)中Bcl-2、C-fos的阳性表达率分别为73.3％，66.7％。VINⅢ中Bcl-2、C-fos的阳性表达率分别为55％，45％。在VINⅠ-VINⅡ中的表达阳性率分别为5%，10%。正常皮肤组织中未见Bcl-2、C-fos的蛋白的表达。VSCC与VINⅢ无显著性差异（P>0.05），VINⅢ与VINⅠ－Ⅱ有显著性差异（P<0.05），VSCC与正常皮肤有显著性差异（P<0.05）（见表）。
C-fos及 C-jun蛋白的表达与外阴鳞癌病理和临床指标之间的关系：随着外阴鳞癌组织分化程度的降低，Bcl-2、C-fos蛋白的表达也随之升高，高低分化的表达程度有显著性差异（P<0.05）。有淋巴结转移的阳性率与无淋巴结转移的阳性率有显著性差异（P<0.05）。但与年龄大小无显著性差异（P>0,05）。
讨 论
Bcl-2 首先在B细胞相关的恶性肿瘤中发现，该肿瘤细胞18号染色体上的Bcl-2异位到14号染色体上，与免疫球蛋白的重链基因串联，形成融合基因，从而使Bcl-2基因在B细胞内异常表达，该基因编码由239个氨基酸组成的分子量为26KD的Bcl-2a和由205的氨基酸组成的分子量为22kd的Bcl-2β蛋白。近年来研究发现Bcl-2基因是细胞凋亡调空中的重要基因。Bcl-2基因在肿瘤发生中发挥作用不是通过加速细胞有丝分裂，而是延长其生存期。这就为肿瘤的发生及发病因素提供了积聚条件，Bcl-2抑制凋亡作用途径可能是阻止引起DNA损伤信号传导给凋亡基因。导致DNA受损的细胞持续存活，突变的产物聚集。
C-fos是核内癌基因，它定位与14号染色体上（14q），C-fos包含5个外显子，其3'末端非编码区的缺失，可使C-fos激活，C-fos是由380个氨基酸组成，是编码为55KD的核内蛋白质。当基因被激活后迅速转录mRNA然后进入胞质中，合成C-fos蛋白，之后较快地进入细胞核，调节细胞核内癌基因，所以称为核内癌基因。在细胞正常增长的情况下，如果C-fos基因过量表达，可破坏细胞生长、浸润及转移的调节，当受到非某些因素影响后，某结构表达失常，从而被激活，此时C-fos具有肿瘤转化活性。所以检测基因产物有助于从蛋白水平认识肿瘤的本质。
本研究用免疫组化方法发现，Bcl-2、C-fos蛋白在正常外阴皮肤不表达，在外阴鳞癌中的表达分别为73.3%和66.7%。在VIN Ⅲ中的表达为分别为55%和45%，表明癌基因在外阴鳞癌的发生发展有着密切的关系。同时，Bcl-2、C-fos在外阴低分化鳞癌中的表达水平明显高于高分化鳞癌（P<0.05），有淋巴结转移的阳性率明显高于无淋巴结转移的阳性率（P<0.05）于文献报道相符合，提示Bcl-2、C-fos基因是预后不良因子，其表达在外因鳞癌的转移过程中起重要作用，目前认为肿瘤的发生、发展是多基因损伤机器编码产物的协同作用结果，外阴鳞癌某些生物学特性的获得至少需几种相失基因的联合作用。我们研究提示Bcl-2、C-fos基因在外阴鳞癌发生发展过程中具有协同作用。
参考文献
1 张建中.BcL-2基因在免疫系统中的作用.国外医学分子生物学分册，1995，17（2）：52
2 王举，窦忠霞.大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义.中国普外基础与临床杂志，2002，9（4）：252~254