用葡萄球菌Cowen Ⅰ激活，然后用EB病毒转化，经数次筛选克隆，建立了一个对BCGF有反应的人B淋巴细胞株。该细胞株被命名为3D5。筛选方法为对PHA刺激T细胞上清液（PHA-T-Sup）刺激有增殖反应，但对rIL-2刺激无增殖反应。流式细胞仪表型分析为：（1）3D5细胞是B细胞，因为CD₃标志（T细胞标志）和CD₁₁标志（单核细胞标志）阴性，而CD₂₀标志（B细胞标志）和sIg则阳性；（2）3D5细胞是活化B细胞，因为CD25（IL-2受体α链的一个表位Tac）和4F2标志阳性（CD25和4F2只表达于活化B细胞）；（3）3D5细胞表达高分子量BCGF受体相关标志BA5。功能试验表明，3D5细胞对cpBCGF刺激有增殖反应。反应强弱与cp BCGF剂量相关。3D5细胞对高分子量BCGF刺激也有增殖反应。但3D5细胞对rIL-2、 rIL-4和rIFN-γ刺激无增殖反应。另外，B淋巴细胞分化因子（BCDF）不能诱导3D5细胞分化至Ig分泌细胞。实验表明，3D5细胞是一个对BCGF有特异反应的人B细胞株。