【摘 要】
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为构建湖羊肌细胞生成素(myogenin,MyoG)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白真核表达载体,分析EGFP-MyoG融合蛋白在NIH-3T3细胞的表达及亚细胞定位。利用PCR技术扩增出MyoG基
【机 构】
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扬州大学动物科学与技术学院,中国农业科学院畜牧研究所国家畜禽分子遗传育种中心
【基金项目】
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国家转基因重大专项“优质转基因肉羊新品种培育”(2008ZX08008-003,2009ZX08008-003B)
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为构建湖羊肌细胞生成素(myogenin,MyoG)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白真核表达载体,分析EGFP-MyoG融合蛋白在NIH-3T3细胞的表达及亚细胞定位。利用PCR技术扩增出MyoG基因完整的CDS,克隆至真核表达载体pEGFP-C1,转染NIH-3T3细胞,荧光显微镜下观察EGFP-MyoG融合蛋白的亚细胞定位,并通过RT-PCR、western blot检测蛋白的表达。酶切鉴定和DNA序列分析均证实,MyoG基因已正确插入pEGFP-C1中,获得融合蛋白表达载体pEGFP-C1
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