NADPH氧化酶介导血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:resway
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目的 探讨NADPH氧化酶在血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化以及细胞外基质积聚中的作用.方法 体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,随机分为以下4组:正常对照组,AngⅡ(10-7mol/L)组,Ang Ⅱ+Los(洛沙坦,10 μmol/L)组及AngⅡ+DPI(NADPH氧化酶活性抑制剂,10 μmol/L)组.应用荧光染料(DCF)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)的产生.RT-PCR检测NADPH氧化酶亚单位p47phox以及纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)1、α平滑肌肌动蛋白(SMA)、E钙黏蛋白(cadherin)mRNA的表达.Western印迹检测p47phox、α-SMA的蛋白表达.结果 (1)外源性Ang Ⅱ可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS的产生,刺激15 min后,ROS的表达较对照组上升了(3.64±0.53)倍.DPI和洛沙坦可显著抑制Ang Ⅱ刺激后ROS的产生(P<0.05).(2)Ang Ⅱ刺激腹膜间皮细胞后,NADPH氧化酶亚单位p47phox mRNA和蛋白的表达均呈上升趋势.洛沙坦和DPI可阻断由Ang Ⅱ诱导的p47phox表达上调(P<0.05).(3)AngⅡ诱导α-SMA表达的上调以及E-cadherin mRNA的下调,洛沙坦和DPI可部分逆转Ang Ⅱ的这种作用.(4)AngⅡ刺激8 h后可明显上调PAI-1的mRNA表达,为正常对照组的(3.06±0.77)倍.洛沙坦和DPI可明显阻断PAI-1的表达上调(P<0.05).结论 NADPH氧化酶依赖产生的ROS介导了Ang Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚.阻断AngⅡ的作用及抑制NADPH氧化酶的表达和活性可作为防治腹膜纤维化的潜在治疗靶点.
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