应用细胞应力加载系统建立HT-22细胞损伤模型。

采用Bioflex细胞培养板接种HT-22细胞，应用FX-5000TFL细胞应力加载系统进行牵张损伤(形变率为13.4%、频率为5.0 Hz)。并按照时间的长短分为对照组和6、12、24 h组。应用数字全息显微镜(DHM)动态检测细胞平均面积和平均厚度值，采用锥虫蓝染色法和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞存活率和LDH的释放情况，并通过流式细胞术检测细胞周期和Sub-G₁期峰的变化。

(1)DHM检测结果显示：与对照组比较，损伤6 h后HT-22细胞面积由(603.9±28.5)μm²降至(182.9±4.5)μm²(t＝21.93, P<0.01)，细胞厚度由(4.0±0.2)μm升至(8.3±0.3)μm(t＝16.65, P<0.01)。(2)细胞存活率结果显示：对照组细胞存活率为(95.0±1.6)%，而损伤后6 h[(59.7±4.5)%]较对照组显著下降(t＝10.44, P<0.01)。损伤后12 h和24 h的细胞存活率[分别为(77.0±2.9)%、(85.0±3.3)%]虽较6 h组上升(分别为t＝4.56, P<0.05；t＝6.45, P<0.01)，但仍低于对照组(分别为t＝7.56, P<0.01；t＝3.873, P<0.05)。(3)LDH检测结果显示：细胞应力加载损伤后6 h，LDH的释放水平[(273.9±4.6 )ng/L]显著高于对照组[(51.7±5.8 )ng/L，t＝42.48, P<0.01]，而12 h组和24 h组LDH的释放水平[分别为(255.2±4.4)ng/L、(240.2±6.0)ng/L]均低于6 h组(分别为t＝4.14, P<0.05；t＝6.28, P<0.01)。(4)流式细胞术检测结果显示：与对照组[(0.6±0.3)%]相比，损伤6 h组Sub-G₁凋亡峰比例[(6.5±0.6)%]显著上升(t＝14.90, P<0.01)，而细胞死亡比例随时间的延长而减少，尤以损伤24 h后[(2.1±0.5)%]的峰值较6 h组降低最为显著(t＝9.61, P<0.01)。

应用细胞应力加载系统成功建立HT-22体外细胞损伤模型，该模型重复性好，操作简便，为进一步研究颅脑创伤的病理生理机制提供了一种精确、有效、可控的模型制作方法。