人白细胞介素24基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovefuture888
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目的:构建人白细胞介素24(hIL-24)基因原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达hIL-24蛋白,并测定其生物学活性。方法:用PCR方法从含有hIL-24的质粒中扩增hIL-24eDNA序列,测序鉴定正确后,应用基因重组技术构建PQE/hIL-24,并转人大肠杆菌(E.coli)M15。IPTG诱导表达目的蛋白,镍凝胶亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析鉴定结果,应用外周血单核细胞(PBMCs),通过ELESA法分别在48和72h检测rhIL-24刺激的PBMCs中IL-6、IFN-γ
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