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【摘要】目的观察注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）对大鼠长期毒性作用，评价其临床用药安全性，为临床用药提供参考依据。方法长期毒性实验：SD大鼠120只，随机分为6组，分别为注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）高、中、低剂量组，头孢他啶组，他唑巴坦钠组和阴性对照组，腹腔注射给药，每日一次，连续6周，观察大鼠长期毒性反应。结果长期毒性试验：与单组分组和对照组相比，其他剂量组各项指标均无明显异常表现；摄食量和体重增长、血液学、血液生化学检查的各项指标、脏器系数与单组分组和对照组比较，均未发现明显改变，病理组织检查亦未发现明显病理改变，且受试药无明显迟缓性毒性。结论在该实验条件下，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）对受试动物未见较单组分长期毒性反应增加，提示其临床用药安全性较高。
【关键词】注射用头孢他啶/他唑巴坦钠；长期毒性
526文章编号：1004-7484（2014）-06-3417-03
头孢他啶（Ceftazidine）为半合成的第三代头孢菌素。适用于敏感革兰氏阴性杆菌所至的败血症、下呼吸系感染、腹腔胆系感染、复杂性尿路感染和严重皮肤軟组织感染。对于由多种耐药革兰氏阴性杆菌引起的免疫缺陷者感染、医院内感染以及革兰氏阴性杆菌或绿脓杆菌所致中枢神经系感染尤为适用。临床应用广泛，抗菌谱广。但随着抗菌药物在临床上的大量应用，特别是不合理的应用及超广谱酶的出现，使细菌耐药性迅速增加。
由于耐药性产生的最主要机制是细菌分泌β-内酰胺酶降解抗生素，因而可通过加入β-内酰胺酶抑制剂解决耐药问题。他唑巴坦钠（Tazobactam sodium）即为一种竞争性不可逆的广谱β-内酰胺酶抑制剂，它与头孢他啶合用时具有很好的协同作用，能通过抑制酶活性克服细菌耐药，恢复细菌对头孢他啶的敏感性。
注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）是由第三代合成头孢菌素类抗生素头孢他啶与不可逆竞争性β-内酰胺酶抑制剂他唑巴坦钠按照3：1的比例组合而成的复方制剂，该复方制剂为解决临床上细菌感染性耐药提供了更好的治疗药物。
为进一步考察注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的用药安全性，本实验进行注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的长期毒性实验，为该药的研究、开发、临床安全用药提供实验依据。
1材料和方法
1.1材料
1.1.1动物SPF级SD种大鼠，体重100-130g，120只，雌雄各半，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，合格证为HNASLKJ20102092号，大鼠饲料购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。
1.1.2试验药物注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（白色粉末，3：1配比，1.2g/瓶，含头孢他啶0.9g，他唑巴坦0.3g，批号：2010102，由海南国瑞堂制药有限公司提供；注射用头孢他啶（白色粉末，1.0g/瓶，批号：2010102，由海口国瑞堂制药有限公司提供）；注射用他唑巴坦钠（白色粉末，1.0g/瓶，批号：2010102，由海口国瑞堂制药有限公司提供），上述药物均冷柜保存，临用前用灭菌注射用水溶解后稀释成所需浓度；氯化钠注射液（海南东联长富有限公司生产，批号：1011051）。
1.1.3试验条件SPF级实验室，温度20-25℃，相对湿度40-70%。雌雄动物分笼饲养，每笼5只，每2日更换垫料一次。
1.1.4检测仪器全自动生化分析仪（株式会社日立高新技术，7020型）；全自动血液分析仪（日本Sysmex CorportionXT-2000i型）。
1.2方法
1.2.1给药剂量及分组120只动物随机均分6组，每组20只，雌雄各半。①注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）高剂量组2.4g/（kg·d）（临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，约得0.04g/kg，约相当于人日用量的60倍）；②注射用头孢他啶他唑巴坦钠（3：1）中剂量组1.2g/（kg·d）（同①方法计算，约相当于人日用量的30倍）；③注射用注射用头孢他啶他唑巴坦钠他唑巴坦钠（3：1）低剂量组0.6g/（kg·d）（同①方法计算，约相当于人日用量的15倍）；④注射用头孢他啶组1.8g/（kg·d），按3：1复合制剂中，临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，其头孢他啶约应为0.03g/kg，约相当于人日用量的60倍；⑤他唑巴坦钠组0.6g/（kg·d），按3：1配比，临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，其他唑巴坦钠约应为0.01g/kg，约相当于人日用量的60倍；⑥对照组给予等体积的氯化钠注射液（海南东联长富有限公司生产，批号：1011051）。
1.2.2给药方法①给药途径：腹腔注射（ip）；②给药体积：各组给药体积固定为1mL/100g体重；③给药周期：每日给药一次，给药时间均在上午8-10时，连续给药6周。
1.2.3方法及观察指标各组动物在实验室观察1周后按上述方法给药，试验期间注意观察各组动物的临床表现，包括行为活动、口、鼻腔分泌物、尿、粪便性状、饲料消耗情况、毛发光泽情况等，每周称体重一次，并根据体重变化调整给药剂量。连续ip给药6周，停药次日，眼眶静脉丛取血检测血液学（包括红细胞、血红蛋白、白细胞总数及分类、血小板、出凝血时间等）、血液生化学（包括丙氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、总蛋白、总胆红素、白蛋白、血糖等），每组活杀12只动物并取高剂量和对照组的心、肝、脾、肺、肾、脑垂体、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、前列腺、子宫、卵巢、胃、十二指肠、胰腺、膀胱、回肠、结肠等组织器官进行病理组织学检查，同时计出各组鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、甲状腺、睾丸（或子宫）、前列腺、肾上腺等的脏器系数，留存8只动物继续观察2周后处死进行与上述相同项目的检查。 1.3统计学方法所有数据用SPSS15.0统计软件包分析，计量资料用均数±标准差（χ±s）表示，配对资料比较采用t检验，检验水准α=0.05。
2结果
2.1一般症状在给药期间，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各组大鼠活动情况正常，外表体征及粪便情况、摄食量与单组分组和对照组比较无明显变化，体重增长亦未见明显差异。
2.2血液学指标给药6周后，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）与单组分组、对照组的红细胞总数、血红蛋白变化值、白细胞总数及分类、血小板总数、出凝血时间等各项血液学指标均未见明显差异。
2.3血液生化指標给药6周后注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的血液生化学指标与单组分组、对照组比较无明显差异。
2.5恢复期观察停药2周，各组大鼠的一般症状如摄食、体重增长、毛发、行为活动未见明显异常，2周后注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各给药组的血液学指标与对照组比较亦无明显差异，脏器系数和病理检查也未见异常改变。
3讨论
本研究按照化学药物长期毒性试验技术指导原则的要求对注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）进行了毒性评价；长期毒性试验结果显示，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各剂量组大鼠在给药期间均未见明显异常的表现；一般症状，摄食量和体重增长与单组分组及对照组相比，差异无统计学意义；给药6周后，大鼠血液学、血液生化学检查的各项指标、脏器系数与单组分组和对照组相比，差异无统计学意义；病理组织学检查亦未见药物引起的异常变化；停药2周后，复合制剂组的各项指标与单组分组和对照组比较，差异无统计学意义；主要脏器未见明显病理改变，提示该受试药无明显停药后的迟缓性毒性。
结果显示，大鼠腹腔注射连续给予注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）6周无毒反应剂量为2.4g/（kg·d），相当于临床人日用量的60倍，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）与头孢他啶（为临床人日用量的60倍）和他唑巴坦钠（为临床人日用量的60倍）比较，复合制剂未见增加单组分的长期毒性，说明注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）长期应用，毒性较小；也无停药后的动物迟缓性毒性。
本研究结果显示：与单组分头孢他啶、他唑巴坦钠相比，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）复方制剂在实验条件下无明显毒性反应，复方制剂较为安全可靠；此外，头孢他啶临床应用广泛，抗菌谱广，与他唑巴坦钠合用有协同治疗作用；两者合用对其体外、体内抗菌作用的研究，证明其具有良好的抗菌效果，且对呼吸、神经和心血管系统无不良影响，具有广泛的临床应用前景。
参考文献
[1]符健，邢桂兰，王世雄.头孢他啶-他唑巴坦钠的体内抗菌作用研究[J].中南药学，2003，1（2）：89-91.
[2]Keel RA，Kuti JL，Sahm DF，et a1.Pharmacolynamic evaluation of iv antimicrobials against pserdomonas aeuginosa samlies collected from US hospitals[J].J Am J Health syst pham，2011，68：1619-1625.
[3]国家食品药品监督管理局.化学药物长期毒性试验技术指导原则[S].2005.
【关键词】注射用头孢他啶/他唑巴坦钠；长期毒性
526文章编号：1004-7484（2014）-06-3417-03
头孢他啶（Ceftazidine）为半合成的第三代头孢菌素。适用于敏感革兰氏阴性杆菌所至的败血症、下呼吸系感染、腹腔胆系感染、复杂性尿路感染和严重皮肤軟组织感染。对于由多种耐药革兰氏阴性杆菌引起的免疫缺陷者感染、医院内感染以及革兰氏阴性杆菌或绿脓杆菌所致中枢神经系感染尤为适用。临床应用广泛，抗菌谱广。但随着抗菌药物在临床上的大量应用，特别是不合理的应用及超广谱酶的出现，使细菌耐药性迅速增加。
由于耐药性产生的最主要机制是细菌分泌β-内酰胺酶降解抗生素，因而可通过加入β-内酰胺酶抑制剂解决耐药问题。他唑巴坦钠（Tazobactam sodium）即为一种竞争性不可逆的广谱β-内酰胺酶抑制剂，它与头孢他啶合用时具有很好的协同作用，能通过抑制酶活性克服细菌耐药，恢复细菌对头孢他啶的敏感性。
注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）是由第三代合成头孢菌素类抗生素头孢他啶与不可逆竞争性β-内酰胺酶抑制剂他唑巴坦钠按照3：1的比例组合而成的复方制剂，该复方制剂为解决临床上细菌感染性耐药提供了更好的治疗药物。
为进一步考察注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的用药安全性，本实验进行注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的长期毒性实验，为该药的研究、开发、临床安全用药提供实验依据。
1材料和方法
1.1材料
1.1.1动物SPF级SD种大鼠，体重100-130g，120只，雌雄各半，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，合格证为HNASLKJ20102092号，大鼠饲料购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。
1.1.2试验药物注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（白色粉末，3：1配比，1.2g/瓶，含头孢他啶0.9g，他唑巴坦0.3g，批号：2010102，由海南国瑞堂制药有限公司提供；注射用头孢他啶（白色粉末，1.0g/瓶，批号：2010102，由海口国瑞堂制药有限公司提供）；注射用他唑巴坦钠（白色粉末，1.0g/瓶，批号：2010102，由海口国瑞堂制药有限公司提供），上述药物均冷柜保存，临用前用灭菌注射用水溶解后稀释成所需浓度；氯化钠注射液（海南东联长富有限公司生产，批号：1011051）。
1.1.3试验条件SPF级实验室，温度20-25℃，相对湿度40-70%。雌雄动物分笼饲养，每笼5只，每2日更换垫料一次。
1.1.4检测仪器全自动生化分析仪（株式会社日立高新技术，7020型）；全自动血液分析仪（日本Sysmex CorportionXT-2000i型）。
1.2方法
1.2.1给药剂量及分组120只动物随机均分6组，每组20只，雌雄各半。①注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）高剂量组2.4g/（kg·d）（临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，约得0.04g/kg，约相当于人日用量的60倍）；②注射用头孢他啶他唑巴坦钠（3：1）中剂量组1.2g/（kg·d）（同①方法计算，约相当于人日用量的30倍）；③注射用注射用头孢他啶他唑巴坦钠他唑巴坦钠（3：1）低剂量组0.6g/（kg·d）（同①方法计算，约相当于人日用量的15倍）；④注射用头孢他啶组1.8g/（kg·d），按3：1复合制剂中，临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，其头孢他啶约应为0.03g/kg，约相当于人日用量的60倍；⑤他唑巴坦钠组0.6g/（kg·d），按3：1配比，临床提供人日用量为2.4g/d，按60kg/人计，其他唑巴坦钠约应为0.01g/kg，约相当于人日用量的60倍；⑥对照组给予等体积的氯化钠注射液（海南东联长富有限公司生产，批号：1011051）。
1.2.2给药方法①给药途径：腹腔注射（ip）；②给药体积：各组给药体积固定为1mL/100g体重；③给药周期：每日给药一次，给药时间均在上午8-10时，连续给药6周。
1.2.3方法及观察指标各组动物在实验室观察1周后按上述方法给药，试验期间注意观察各组动物的临床表现，包括行为活动、口、鼻腔分泌物、尿、粪便性状、饲料消耗情况、毛发光泽情况等，每周称体重一次，并根据体重变化调整给药剂量。连续ip给药6周，停药次日，眼眶静脉丛取血检测血液学（包括红细胞、血红蛋白、白细胞总数及分类、血小板、出凝血时间等）、血液生化学（包括丙氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、总蛋白、总胆红素、白蛋白、血糖等），每组活杀12只动物并取高剂量和对照组的心、肝、脾、肺、肾、脑垂体、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、睾丸、前列腺、子宫、卵巢、胃、十二指肠、胰腺、膀胱、回肠、结肠等组织器官进行病理组织学检查，同时计出各组鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、甲状腺、睾丸（或子宫）、前列腺、肾上腺等的脏器系数，留存8只动物继续观察2周后处死进行与上述相同项目的检查。 1.3统计学方法所有数据用SPSS15.0统计软件包分析，计量资料用均数±标准差（χ±s）表示，配对资料比较采用t检验，检验水准α=0.05。
2结果
2.1一般症状在给药期间，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各组大鼠活动情况正常，外表体征及粪便情况、摄食量与单组分组和对照组比较无明显变化，体重增长亦未见明显差异。
2.2血液学指标给药6周后，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）与单组分组、对照组的红细胞总数、血红蛋白变化值、白细胞总数及分类、血小板总数、出凝血时间等各项血液学指标均未见明显差异。
2.3血液生化指標给药6周后注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）的血液生化学指标与单组分组、对照组比较无明显差异。
2.5恢复期观察停药2周，各组大鼠的一般症状如摄食、体重增长、毛发、行为活动未见明显异常，2周后注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各给药组的血液学指标与对照组比较亦无明显差异，脏器系数和病理检查也未见异常改变。
3讨论
本研究按照化学药物长期毒性试验技术指导原则的要求对注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）进行了毒性评价；长期毒性试验结果显示，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）各剂量组大鼠在给药期间均未见明显异常的表现；一般症状，摄食量和体重增长与单组分组及对照组相比，差异无统计学意义；给药6周后，大鼠血液学、血液生化学检查的各项指标、脏器系数与单组分组和对照组相比，差异无统计学意义；病理组织学检查亦未见药物引起的异常变化；停药2周后，复合制剂组的各项指标与单组分组和对照组比较，差异无统计学意义；主要脏器未见明显病理改变，提示该受试药无明显停药后的迟缓性毒性。
结果显示，大鼠腹腔注射连续给予注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）6周无毒反应剂量为2.4g/（kg·d），相当于临床人日用量的60倍，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）与头孢他啶（为临床人日用量的60倍）和他唑巴坦钠（为临床人日用量的60倍）比较，复合制剂未见增加单组分的长期毒性，说明注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）长期应用，毒性较小；也无停药后的动物迟缓性毒性。
本研究结果显示：与单组分头孢他啶、他唑巴坦钠相比，注射用头孢他啶/他唑巴坦钠（3：1）复方制剂在实验条件下无明显毒性反应，复方制剂较为安全可靠；此外，头孢他啶临床应用广泛，抗菌谱广，与他唑巴坦钠合用有协同治疗作用；两者合用对其体外、体内抗菌作用的研究，证明其具有良好的抗菌效果，且对呼吸、神经和心血管系统无不良影响，具有广泛的临床应用前景。
参考文献
[1]符健，邢桂兰，王世雄.头孢他啶-他唑巴坦钠的体内抗菌作用研究[J].中南药学，2003，1（2）：89-91.
[2]Keel RA，Kuti JL，Sahm DF，et a1.Pharmacolynamic evaluation of iv antimicrobials against pserdomonas aeuginosa samlies collected from US hospitals[J].J Am J Health syst pham，2011，68：1619-1625.
[3]国家食品药品监督管理局.化学药物长期毒性试验技术指导原则[S].2005.