肾综合征出血热病毒核酸在乳长爪沙鼠体内的分布及定位研究——生物素探针原位杂交法

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellomfc
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本文报告用小鼠摄金蛋白-1(mMT-1)启动子构建了乙肝病毒(HBV)S基因的重组质粒。该质粒中同时组装了SV40启动子及其控制下的小鼠二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的cDNA片段。用磷酸钙沉淀法将表达载体DNA导入CHO-dhfr-细胞,获得表达。克隆表达的阳性率为88%。氨甲喋呤(MTX)可使克隆H4细胞系HBsAg的表达量提高1倍。经打点杂交检测表明在MTX的压力下,S基因随着dhfr基因的
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我国是乙型肝炎高发区,西藏地区的肝炎更为严重。根据1986年全国流行病调查,西藏地区的肝炎现患率居全国第3位(5435.3/10万),乙肝表面抗原携带率居全国第2位(16.8%)。为了研究该地区丁型肝炎感染率,我们从1988年至1990年共收集乙肝表面抗原阳性病人血清346份,乙肝表面抗原阳性携带者血清159份,其中藏族血清367份,汉族血清158份,乙肝病人中抗丁肝抗体阳性率为3.4%,携带者中
本文报道了首次从我国猪群中分离20株猪型(H1N1)流感病毒及其来源调查的结果。抗原性和核酸点杂交分析表明,新分离毒株8个基因节段均来源猪的流感病毒,而不是来自禽和人的流感病毒,也不是由猪和禽或人流感病毒重组而来。根据毒粒Np基因的核苷酸全序和Np蛋白氨基酸全序分析指出,新毒株的Np基因和Np蛋白与当前美国猪群中流行的猪型毒株很相似,而与古典的猪型毒株有差异。故推测新病毒可能是通过猪种交换,近期由
选用与A组轮状病毒(Rotavirus,RV)第9(8)基因两保守末端序列互补的引物,扩增了4个血清型RV核酸,均产生1Kb大小的产物片段,可检测到≥30fg的病毒核酸量(150份基因拷贝)。用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法将扩增产物标记上异羟基洋地黄毒甙原(Digoxigenin,Dig)后,与轮状病毒核酸进行斑点杂交试验,结果阳性。用PCR法扩增经
继我国A组人轮状病毒(HRV)引起婴幼儿腹泻及B组轮状病毒引起成人和新生儿腹泻流行之后,我们又鉴定出一株命名为D25株的新型RV,即 "超短" RNA型RV(Super short" RNA pattern)。
期刊
用聚合酶链反应(PCR)技术检测23份病毒分离之组织培养物中HCMV-DNA,其中13份阳性,与细胞学鉴定及单克隆抗体法鉴定结果符合率为100%,该法简便、特异、敏感性高,可在5小时内检出20fg HCMV-DNA,本文还对标本处理及如何避免假阳性问题作了讨论。
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本文介绍在应用聚合酶链反应(PCR)检测3例肝脏及石蜡切片中的乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)过程中的具体方法、经验和体会;发现冰冻切片应用酚提法;石蜡切片采用水煮法,可以获得较高质量的DNA。在检测PCR产物时,EB胶中电泳和Southern杂交相比,后者具有更高的特异性和敏感性,故对PCR作结论时,应该以Southern杂交的结果为准。两个引物的浓度必须相等,否则会由于不对称扩增而出现双重