【摘 要】
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目的制备结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌蛋白Rv0674,筛选与Rv0674蛋白特异性结合的肽分子。方法用PCR从MTB(H37Rv)基因组中扩增出Rv0674基因。克隆到pEAS
【基金项目】
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国家自然科学基金(81560604);宁夏高等学校一流学科建设(NXYLXK2017B07);宁夏医科大学校级项目(YJSCXCY2018023)
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目的制备结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌蛋白Rv0674,筛选与Rv0674蛋白特异性结合的肽分子。方法用PCR从MTB(H37Rv)基因组中扩增出Rv0674基因。克隆到pEASY-E1表达载体上,将测序验证正确的重组表达质粒转化入E.coli BL21中,用IPTG诱导蛋白表达,Ni2+亲和层析法纯化目的蛋白。通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,将纯化后的Rv0674蛋白包被到96孔板上,再利用噬菌体展示技术,经过连续4轮特异性亲和筛选
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