【摘 要】
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目的:体外进行人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)原代培养及鉴定。方法:用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法收集HUVECs,加入含20%胎牛血清的M199培养基
【机 构】
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南京医科大学第二附属医院内分泌科,
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目的:体外进行人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)原代培养及鉴定。方法:用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法收集HUVECs,加入含20%胎牛血清的M199培养基在37℃、5%CO2孵箱中培养,用Tryple express进行消化传代培养。采用细胞形态学观察、流式细胞仪测定CD34鉴定细胞。结果:原代培养的HUVECs在24h完全贴壁,在3～5天融合成片,呈现单层铺路石样改变。流式细胞仪测定内皮细胞纯度为75.52%。结论:Ⅱ胶原酶及Tryple express的灵活使用可获得大量连续传代培养的HUVECs。
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