联合分子检测法对腹泻患者粪便中致泻性大肠埃希菌的调查

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目的 采用胃肠道感染测试条(FAGI)联合实时聚合酶链式反应(PCR)直接检测法,回顾性调查山东省青岛市腹泻患者致泻性大肠埃希菌(DEC)的感染情况及菌株基因型,并与传统方法进行比较,探讨不同检测方法在腹泻监测中的应用.方法 对2018年青岛市2家哨点医院采集的263份腹泻粪便标本,采用传统培养法分离大肠埃希菌并送至青岛市疾病预防控制中心,利用多重PCR方法鉴定DEC;同时采用FA GI联合实时PCR的方法直接检测粪便中的DEC.将每5份粪便样标本混合为1份混合样品,用FA GI进行检测,再用实时PCR方法检测阳性混合样品中的单个样品.结果 263份标本中,采用传统分离培养联合多重PCR法检测,15份样品阳性,阳性率为5.7%.其中,肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)阳性的标本分别为7、4、3、1份.采用FA GI联合实时PCR直接检测法检测,阳性样品35份,阳性率为13.3%.其中ETEC、EAEC、EPEC、EIEC阳性的标本分别为12、12、9、2份.2种方法均未检到产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)阳性的标本.2种方法毒力基因检测结果一致.EAEC、ETEC、EPEC携带的主要毒力基因分别为pic、estlb和eae.结论 FA GI联合实时PCR直接检测法显著提高了粪便中DEC的检出率,敏感性和特异性高,省时省力,可以辅助DEC常规监测,准确地反映DEC的流行和分布情况,为DEC的防控提供有力的实验室依据.
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