【摘 要】
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极端嗜热菌海栖热袍菌MSB8(Thermotoga maritima MSB8)能够利用木聚糖代谢,并具有两个产木聚糖酶的基因.本研究首次克隆和在大肠杆菌中表达海栖热袍菌MSB8的第2个木聚糖酶基
【机 构】
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中国农业大学食品学院,北京,100083食品综合研究所酵素利用研究室,筑波305,日本;
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极端嗜热菌海栖热袍菌MSB8(Thermotoga maritima MSB8)能够利用木聚糖代谢,并具有两个产木聚糖酶的基因.本研究首次克隆和在大肠杆菌中表达海栖热袍菌MSB8的第2个木聚糖酶基因即xynB基因.以基因组DNA为模板,根据xynB基因的全序列设计了两对引物,在合适的PCR反应条件下有效地扩增出了xynB基因片段.选用pET28a(+)表达载体,NcoI-HindⅢ酶切位点并编码了羧基端6×His标签的阳性克隆表达成可溶且具有生物活性的蛋白质.xynB结构基因由1 044对碱基组成,编码347个氨基酸.根据已知木聚糖酶蛋白质氨基酸的同源性分析,XynB与T. sp.strainFjSS3-B.1的XynA的同源性最大,为85%,与T.neapolitana的XynB同源性次之,为82%,与其它木聚糖酶的同源性小于43%.另外,XynB属于F/10族木聚糖酶,且含有单一功能区.表3图3参12
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