基于两种质谱技术检测蛋白酶酶切位点的方法

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目的 探索MALID-TOF/TOF和LC-MS/MS两种质谱法对蛋白酶专一性酶切位点检测的有效性.方法 首先对两段合成多肽S1及S2采用胰蛋白酶进行酶切,再对酶切产物用两种质谱法进行检测,以确定胰蛋白酶对于底物的酶切位点.结果 胰蛋白酶对于多肽S1的酶切位点是第6位赖氨酸残基(K)和第21位精氨酸残基(R),对于多肽S2的酶切位点是第21位精氨酸残基(R),这与已证实的胰蛋白酶专一性酶切位点相一致.结论 两种质谱法均可用于检测蛋白酶对于底物分子酶切位点的鉴定.用LC-MS/MS液质联用系统对酶切位点进行分析更可靠,而MALDI-TOF/TOF质谱仪检测较快,用于监测酶切程度更便捷.
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