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目的
探讨不同浓度吗啡对新生小鼠皮层神经元活力和突触可塑性的影响。
方法出生24 h内的雄性C57/BL/6小鼠,分离皮层神经元,按2×106、1×105、1.5×104个/皿或孔的密度分别接种于60 mm培养皿、24孔板和96孔板,培养7 d。采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(C组)给予PBS孵育48 h;不同浓度吗啡组分别给予1.0 mmol/L(M1组)、10.0 mmol/L(M2组)和100.0 mmol/L(M3组)吗啡孵育48 h,60 mm培养皿为10 ml,24孔板为500 ml,96孔板为100 ml。采用MTT法测定神经元活力,采用免疫荧光法检测微管相关蛋白-2标记的神经元树突长度,采用Western blot法测定小窝蛋白-1(Cav-1)、生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触蛋白、突触素Ⅰ和突触囊膜蛋白的表达水平。
结果与C组比较,M2组树突长度延长,神经元Cav-1、GAP-43、突触蛋白、突触素Ⅰ和突触囊泡蛋白表达上调,M3组神经元活力下降,神经元Cav-1、GAP-43和突触囊泡蛋白表达上调(P<0.05)。
结论吗啡10.0 mmol/L既不会对新生小鼠皮层神经元造成损伤,又可以增强神经元突触可塑性。