D-2-氨基戊酸对创伤性神经元细胞内游离钙及游离氢的影响

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目的研究液压冲击伤时体外培养的大鼠神经元细胞内游离钙([Ca2+]i)及游离氢([H+]i)的变化,探讨D-2-氨基戊酸(D-AP-5)对创伤后神经元细胞内[Ca2+]i及[H+]i的影响及其机制.方法以Fluo-3/AM和BCECF/AM分别为细胞内钙离子和氢离子的荧光指示剂,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的神经元细胞内[Ca2+]i及[H+]i的变化.结果液压冲击伤后神经细胞内游离钙和游离氢迅速升高,伤后仅15分钟,[Ca2+]i即达324.197±38.606 nmol(P<0.01),[H+]i pH值达7.04±0.033(P<0.01),[Ca2+]i于伤后24小时达高峰(2 664.17±155.09 nmol),[H+]i于伤后12 h达高峰(pH值6.016±0.196),随后逐渐下降,48 h仍维持较高水平(P<0.01).D-AP-5可明显降低创伤后神经元细胞内[Ca2+]i及[H+]i升高.伤后22 h以内给药明显降低创伤后细胞内游离钙的升高(P<0.01),而伤后10 h之内应用可明显降低创伤后细胞内游离氢的升高(P<0.01),伤后22小时以上应用则无效(P>0.05).结论创伤后神经元细胞出现钙超载和酸中毒.D-AP-5可降低创伤后神经元细胞内[Ca2+]i及[H+]i升高,但D-AP-5应用的有效时间窗不同.揭示对创伤性脑损伤的治疗应强调D-AP-5应用的最佳时间窗.
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