【摘 要】
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目的探讨微小RNA(microRNAs，miRNAs)在乙型肝炎病毒（HBV）感染不同时期表达谱的变化及其意义。方法建立检测miRNA的RNA DNA嵌合探针液态芯片（xMAP）法，对其特异性、重复性、准确性进行评估；2010年10月至2011年10月收集苏州大学附属第一医院住院和门诊急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化及肝癌患者各40例，健康对照40名；采用xMAP液态芯片技术检测外周血
【机 构】
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215006苏州大学附属第一医院检验科,215006苏州大学附属第一医院检验科,215006苏州大学附属第一医院检验科,215006苏州大学附属第一医院检验科,215006苏州大学附属第一医院检验科,
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目的探讨微小RNA(microRNAs，miRNAs)在乙型肝炎病毒（HBV）感染不同时期表达谱的变化及其意义。
方法建立检测miRNA的RNA DNA嵌合探针液态芯片（xMAP）法，对其特异性、重复性、准确性进行评估；2010年10月至2011年10月收集苏州大学附属第一医院住院和门诊急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化及肝癌患者各40例，健康对照40名；采用xMAP液态芯片技术检测外周血单个核细胞（PBMC）中miR-191、-223、-222、-145、-21、-31、-126、-20a、-372的表达水平，以miR-103为内参，将（靶miRNA分子平均荧光强度-对应本底平均荧光强度）/（miR-103平均荧光强度-对应本底平均荧光强度）的比值作为有效数据分析各组miRNAs表达特征，采用SPSS 17.0统计软件，组间比较用单因素方差分析，若差异有统计学意义，用LSD-t法行组间两两比较。
结果xMAP液态芯片法检测miRNAs特异性为100%；重复性实验证实高值参比品的检测信号CV值均小于5%，低值参比品的检测信号CV值均小于10%；准确性实验证实9种miRNA的回收率为（100±5）%；miR-222（F=1.32，P>0.05）、-191（F=1.98，P>0.05）、-145（F=0.78，P>0.05）、-21（F=0.64，P>0.05）、-31（F=0.83，P>0.05）、-372（F=1.75，P>0.05）组间表达差异无统计学意义；miR-223组间表达差异有统计学意义（F=14.56，P<0.05），在急性乙型肝炎组表达最高（15.37±4.01），肝癌组表达最低（6.91±3.18）；组间miR-126表达差异有统计学意义（F=17.43，P<0.05），在健康对照组表达最高（6.33±2.75），肝癌组表达最低（2.38±1.07）；组间miR-20a表达差异有统计学意义（F=19.48，P<0.05），健康对照组表达最低（0.33±0.18），肝癌组表达最高（0.81±0.24）。
结论xMAP液态芯片法检测miRNA特异性强、准确度高、重复性好，适合大通量临床检测；miRNA的检测可为HBV感染的慢性化进展机制提供一个新的研究线索。（中华检验医学杂志，2012,35：544-549）
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