【摘 要】
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目的: 筛选老年性白内障与正常晶体上皮细胞的差异表达基因.方法: 利用改良消减杂交法获得差异cDNA,利用PCR法扩增其中大片段差异cDNA,将其克隆入质粒载体,通过反向点杂交排
【机 构】
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第四军医大学西京医院眼科,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,唐都医院医教部
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目的: 筛选老年性白内障与正常晶体上皮细胞的差异表达基因.方法: 利用改良消减杂交法获得差异cDNA,利用PCR法扩增其中大片段差异cDNA,将其克隆入质粒载体,通过反向点杂交排除假阳性克隆后,阳性克隆测序与GenBank中的序列进行比较,新序列进行计算机分析.结果: 在文库中随机挑选约600个克隆酶切鉴定,获得≥750 bp片段400个.经反向点杂交,排除假阳性克隆后,共得到阳性克隆150个;测序的50个片段中,有30个已知基因(包括20个功能已知基因、10个序列已知但功能未知基因),3个新序列.新序列
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