探讨不同浓度内皮素-1(ET-1)对大鼠血管平滑肌细胞(A7r5细胞株)内源性一氧化氮(NO)及硫化氢(H₂S)体系的影响。

将A7r5细胞分为对照组和实验组，在实验组中分别加入浓度为10^－8～10^－6 mol/L的ET-1，对照组加入等体积的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)，48 h后分别应用NO和H₂S探针原位检测A7r5细胞中NO及H₂S水平，分别采用NO测定试剂盒和敏感硫电极法检测细胞上清中NO及H₂S水平，应用Western blot法检测A7r5细胞中诱导型一氧化氮合酶(NOS2)、内皮型一氧化氮合酶(NOS3)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、胱硫醚-β-合成酶(CBS)及细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。

10^－8、10^－7及10^－6 mol/L ET-1处理的A7r5细胞内NO水平的相对荧光强度(0.078±0.080、0.075±0.002、0.056±0.009)均低于对照组(0.094±0.061)，差异有统计学意义(F＝15.248，P<0.05)；细胞上清中NO水平[(1.391±0.134) μmol/L、(1.219±0.280) μmol/L、(1.116±0.181) μmol/L]均明显低于对照组[(2.131±0.484) μmol/L]，差异有统计学意义(F＝20.833，P<0.01)；NOS2 (0.457±0.097、0.462±0.116、0.438±0.180)明显低于对照组(0.721±0.222)，差异有统计学意义(F＝6.196，P<0.05)；NOS3蛋白表达差异无统计学意义(F＝2.669，P>0.05)。10^－8、10^－7、10^－6 mol/L ET-1组A7r5细胞内H₂S水平的相对荧光强度(0.063±0.002、0.056±0.008、0.042±0.009)低于对照组(0.082±0.006)，差异有统计学意义(F＝16.297，P<0.01)；细胞上清中H₂S水平[(19.961±3.428) μmol/L、(17.516±5.144) μmol/L、(14.481±4.885) μmol/L]均明显低于对照组[(29.439±4.236) μmol/L]，差异有统计学意义(F＝12.518，P<0.01)；CBS蛋白表达(0.359±0.096、0.270±0.038、0.174±0.051)均低于对照组(0.707±0.107)，差异有统计学意义(F＝20.833，P<0.01)，CSE蛋白表达差异无统计学意义(F＝0.708，P>0.05)。10^－7 mol/L ET-1组细胞PCNA表达高于对照组(0.686±0.180比0.437±0.191)，差异有统计学意义(t＝－2.840，P<0.01)。

ET-1刺激可导致血管平滑肌细胞增殖，并使其内源性NO和H₂S体系下调。