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摘 要：目的：分析罗红霉素含量测定技术。方法：选取罗红霉素样本进行配比研究，同时利用高效液相色谱以及流动相来进行波长以及吸光度的测定，采用实验对比分析的方法，总结得出罗红霉素的实际含量。结果：根据实验测定数据可以了解到，罗红霉素含量精确度以及稳定性均处于良好的状态，原料药、片剂以及分散片的含量各不相同。并且在不同的温度、反应时间以及试剂、溶剂的不同用量等情况下，罗红霉素的含量也会有所不同。结论：合理的应用荷移光谱法和相关的测定技术来对罗红霉素含量进行测定，可有效的得出具体的罗红霉素含量。
关键词：罗红霉素；含量测定；测定技术
所謂的荷移反应就是指代的利用富电子以及缺电子等相关的物质来对电荷实施转移，这样就形成了络合物，在一些物质生成的过程中，荷移络合物的颜色以及吸收波长等均表现出一定的特性，在一定的时期就会对需要测定的物质含量进行反映。采用荷移光谱法就可以针对各种物质进行含量的测定，尤其是针对罗红霉素。荷移光谱法这一方法，在实际的物质含量测定中，应用相对较为简便，而且测定结果较为精确，能够保障试剂的稳定性，会使得测量物质的重现性得以有效的突出，所以，在实际的应用这种方法具有较为广泛的推广价值。
罗红霉素属于抗生素的一种，其主要针对的病菌就是格兰阳性菌以及厌氧菌等。这些细菌的危害性较强。现阶段，这对罗红霉素进行测定的方法主要应用的就是伏安法以及SP法等一些传统的方法，这些方法测定结果不精确，无法满足实际的测定需求。因此，相关的测定人员纷纷开始采用荷移光谱法来对罗红霉素含量进行测定。本文就主要通过实验研究的方法，来对荷移光谱法在罗红霉素含量进行测定研究在，并分析罗红霉素的荷移反应，这种方法的应用，有效的测定出相关药物中罗红霉素的含量，现将具体报道如下。
1 资料与方法
1.1 主要试剂与设备
TCNQ（Sigma公司产品）丙酮溶液：5.0×10-3mol/L；标准罗红霉素（罗红霉素对照品，购自中国药物生物制品检定所）：1.0×10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等有机试剂均为分析纯。罗红霉素片（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号05011251；江苏亚邦爱普森药业有限公司，批号0411129）。实验用水均为二次蒸馏水。UV2401PC型紫外可见分光光度计（日本岛津）；HHS 21Ni型恒温水浴（北京靖卫科学仪器厂）。
1.2 实验方法
选定样品试剂，并应用能够承装10ml溶液的比色管进行丙酮溶液的承装，所承装的丙酮溶液量需要控制为5.0×10-3mol/L。同时在比色管中，加入适量的罗红霉素，利用丙酮溶液来对罗红霉素进行稀释，直到比色管中的混合液达到了标准刻度的时候，就可以充分的对两种物质进行摇匀处理，在进行混合液配制的过程中，需要将温度控制在30℃，并且两种物质的反应时间也需要控制在20min，将摇匀的溶液放置到低温环境下，进行冷冻，直到混合物的温度下降到室温温度值即可停止冷冻。最后配制一个相应的空白试剂，利用该试剂与混合试剂进行对比分析，利用比色皿来对两个试剂的吸光度进行检测，而吸光度的检测位置设定在743nm以及842nm的位置处。
1.3 样品的测定
1.3.1 样品的准备：取不同厂家生产的罗红霉素各10片（标示量均为每片150mg），精确称量后研磨混匀，然后准确称取总量的十分之一，用丙酮溶解，过滤，弃去不溶物。滤液于100ml容量瓶中定容备用。
1.3.2 样品的测定：取适量上述制备好的样品试液于10ml比色管中，按实验方法在λ max处进行测定，另按药典方法测定相同药物制剂含量，并用标准加入法作回收率实验。
2 结果
2.1 罗红霉素吸收光谱
按1.2实验方法配制溶液，以相应的试剂空白为参比，绘制吸收光谱。试验表明，罗红霉素与TCNQ形成的络合物分别在波长743、844nm处有两个吸收峰，试剂在此波长范围内吸收较小，罗红霉素在此波长范围内无吸收。
2.2 反应温度的影响
分别在10℃～60℃恒温一定时间后测量荷移络合物的吸光度，研究温度对荷移反应的影响。试验表明，反应的最佳温度为30℃。
2.3 反应时间的影响
控制反应温度为30℃，分别选择反应时间为10～50min，测定溶液吸光度，研究反应时间对生成络合物的影响。试验表明，最佳时间为20min。混合物在室温下放置，120min内溶液的吸光度稳定。
2.4 试剂用量的影响
改变试剂用量，研究试剂用量对反应的影响。实验表明，随着试剂用量的增加，荷移络合物的吸光度增大，当试剂用量达到一定时，溶液的吸光度基本保持不变，说明荷移反应趋于完全。适宜试剂用量为2.00ml。
2.5 溶剂的影响
分别用甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等作溶剂，研究溶剂对反应的影响。实验表明，以丙酮作溶剂为好，其荷移络合物吸光度最大且稳定。
2.6 方法的重现性
移取6份罗红霉素进行测定，测定结果的相对标准偏差为1.0%，说明方法重现性较好。
2.7 络合物组成的测定
应用等摩尔连续变化法和平衡移动法测得罗红霉素与TCNQ反应生成的荷移络合物的组成比均为1∶2。
2.8 标准曲线：按实验确定的最佳条件配制溶液并进行反应，在各自的最大吸收波长下测定荷移络合物的吸光度，将测得的数据作统计处理，绘制工作曲线，得到回归方程及线性范围。
3 讨论
所谓的荷移反应是以一些特定的物质为基础，在发生荷移的情况下，使得络合物产生一种特殊的颜色，并且能够对波长等进行有效的吸收，由于其具有该特性，所以能够对需要测定物质的含量进行精细的测定。目前，在对一些特定的药物以及物质进行含量测定的过程中，采用的主要方法主要就是荷移光谱法，这种方法在实际的应用中，既具有经济价值又具有实用价值，所以，在药物分析上，其具有广泛的应用价值。
虽然目前针对药物含量进行测定采用的方法还多为紫外分光光度法，这种方法能够使得药物成分在波长为200-400nm的范围内进行测定和扫描，从而使得罗红霉素可以在波长为212nm处进行波长的吸收。而相关的研究资料也表明，采用末端吸收波长或测定中改变检测波长来检测罗红霉素，在实际的应用过程中，应用的效果并不理想，无法有效的测定出罗红霉素的含量。罗红霉素在210nm检测时，试剂可能有吸收；在215～230nm检测时，制剂辅料出现较强的吸收峰，均干扰罗红霉素主峰的测定。因为HPLC检测波长不一定是最大吸收波长，因此本文采用荷移光谱法进行检测，虽然在最低检出量上作了一点牺牲，但可提高进样剂量来弥补因检测波长的提高而吸收度下降的不足，以达到定量的要求，并可排除辅料和其它杂质峰的干扰。
综上所述，合理的应用荷移光谱法和相关的测定技术来对罗红霉素含量进行测定，可有效的得出具体的罗红霉素含量。
参考文献
[1]黄薇，王峰，王守兴.罗红霉素含量的荷移光谱法测定[EB/OL].论文网，2011.6.
[2]秦永平，黄英，梁茂植等.血清中罗红霉素的反相高效液相色谱法测定[J].药物分析杂志，1997，17（4）：249.
[3]吴振洁，李敏伶，叶飞云.改变检测波长高效液相色谱法测定罗红霉素片的含量[J].中国抗生素杂志，1997，22（6）：187.
关键词：罗红霉素；含量测定；测定技术
所謂的荷移反应就是指代的利用富电子以及缺电子等相关的物质来对电荷实施转移，这样就形成了络合物，在一些物质生成的过程中，荷移络合物的颜色以及吸收波长等均表现出一定的特性，在一定的时期就会对需要测定的物质含量进行反映。采用荷移光谱法就可以针对各种物质进行含量的测定，尤其是针对罗红霉素。荷移光谱法这一方法，在实际的物质含量测定中，应用相对较为简便，而且测定结果较为精确，能够保障试剂的稳定性，会使得测量物质的重现性得以有效的突出，所以，在实际的应用这种方法具有较为广泛的推广价值。
罗红霉素属于抗生素的一种，其主要针对的病菌就是格兰阳性菌以及厌氧菌等。这些细菌的危害性较强。现阶段，这对罗红霉素进行测定的方法主要应用的就是伏安法以及SP法等一些传统的方法，这些方法测定结果不精确，无法满足实际的测定需求。因此，相关的测定人员纷纷开始采用荷移光谱法来对罗红霉素含量进行测定。本文就主要通过实验研究的方法，来对荷移光谱法在罗红霉素含量进行测定研究在，并分析罗红霉素的荷移反应，这种方法的应用，有效的测定出相关药物中罗红霉素的含量，现将具体报道如下。
1 资料与方法
1.1 主要试剂与设备
TCNQ（Sigma公司产品）丙酮溶液：5.0×10-3mol/L；标准罗红霉素（罗红霉素对照品，购自中国药物生物制品检定所）：1.0×10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等有机试剂均为分析纯。罗红霉素片（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号05011251；江苏亚邦爱普森药业有限公司，批号0411129）。实验用水均为二次蒸馏水。UV2401PC型紫外可见分光光度计（日本岛津）；HHS 21Ni型恒温水浴（北京靖卫科学仪器厂）。
1.2 实验方法
选定样品试剂，并应用能够承装10ml溶液的比色管进行丙酮溶液的承装，所承装的丙酮溶液量需要控制为5.0×10-3mol/L。同时在比色管中，加入适量的罗红霉素，利用丙酮溶液来对罗红霉素进行稀释，直到比色管中的混合液达到了标准刻度的时候，就可以充分的对两种物质进行摇匀处理，在进行混合液配制的过程中，需要将温度控制在30℃，并且两种物质的反应时间也需要控制在20min，将摇匀的溶液放置到低温环境下，进行冷冻，直到混合物的温度下降到室温温度值即可停止冷冻。最后配制一个相应的空白试剂，利用该试剂与混合试剂进行对比分析，利用比色皿来对两个试剂的吸光度进行检测，而吸光度的检测位置设定在743nm以及842nm的位置处。
1.3 样品的测定
1.3.1 样品的准备：取不同厂家生产的罗红霉素各10片（标示量均为每片150mg），精确称量后研磨混匀，然后准确称取总量的十分之一，用丙酮溶解，过滤，弃去不溶物。滤液于100ml容量瓶中定容备用。
1.3.2 样品的测定：取适量上述制备好的样品试液于10ml比色管中，按实验方法在λ max处进行测定，另按药典方法测定相同药物制剂含量，并用标准加入法作回收率实验。
2 结果
2.1 罗红霉素吸收光谱
按1.2实验方法配制溶液，以相应的试剂空白为参比，绘制吸收光谱。试验表明，罗红霉素与TCNQ形成的络合物分别在波长743、844nm处有两个吸收峰，试剂在此波长范围内吸收较小，罗红霉素在此波长范围内无吸收。
2.2 反应温度的影响
分别在10℃～60℃恒温一定时间后测量荷移络合物的吸光度，研究温度对荷移反应的影响。试验表明，反应的最佳温度为30℃。
2.3 反应时间的影响
控制反应温度为30℃，分别选择反应时间为10～50min，测定溶液吸光度，研究反应时间对生成络合物的影响。试验表明，最佳时间为20min。混合物在室温下放置，120min内溶液的吸光度稳定。
2.4 试剂用量的影响
改变试剂用量，研究试剂用量对反应的影响。实验表明，随着试剂用量的增加，荷移络合物的吸光度增大，当试剂用量达到一定时，溶液的吸光度基本保持不变，说明荷移反应趋于完全。适宜试剂用量为2.00ml。
2.5 溶剂的影响
分别用甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等作溶剂，研究溶剂对反应的影响。实验表明，以丙酮作溶剂为好，其荷移络合物吸光度最大且稳定。
2.6 方法的重现性
移取6份罗红霉素进行测定，测定结果的相对标准偏差为1.0%，说明方法重现性较好。
2.7 络合物组成的测定
应用等摩尔连续变化法和平衡移动法测得罗红霉素与TCNQ反应生成的荷移络合物的组成比均为1∶2。
2.8 标准曲线：按实验确定的最佳条件配制溶液并进行反应，在各自的最大吸收波长下测定荷移络合物的吸光度，将测得的数据作统计处理，绘制工作曲线，得到回归方程及线性范围。
3 讨论
所谓的荷移反应是以一些特定的物质为基础，在发生荷移的情况下，使得络合物产生一种特殊的颜色，并且能够对波长等进行有效的吸收，由于其具有该特性，所以能够对需要测定物质的含量进行精细的测定。目前，在对一些特定的药物以及物质进行含量测定的过程中，采用的主要方法主要就是荷移光谱法，这种方法在实际的应用中，既具有经济价值又具有实用价值，所以，在药物分析上，其具有广泛的应用价值。
虽然目前针对药物含量进行测定采用的方法还多为紫外分光光度法，这种方法能够使得药物成分在波长为200-400nm的范围内进行测定和扫描，从而使得罗红霉素可以在波长为212nm处进行波长的吸收。而相关的研究资料也表明，采用末端吸收波长或测定中改变检测波长来检测罗红霉素，在实际的应用过程中，应用的效果并不理想，无法有效的测定出罗红霉素的含量。罗红霉素在210nm检测时，试剂可能有吸收；在215～230nm检测时，制剂辅料出现较强的吸收峰，均干扰罗红霉素主峰的测定。因为HPLC检测波长不一定是最大吸收波长，因此本文采用荷移光谱法进行检测，虽然在最低检出量上作了一点牺牲，但可提高进样剂量来弥补因检测波长的提高而吸收度下降的不足，以达到定量的要求，并可排除辅料和其它杂质峰的干扰。
综上所述，合理的应用荷移光谱法和相关的测定技术来对罗红霉素含量进行测定，可有效的得出具体的罗红霉素含量。
参考文献
[1]黄薇，王峰，王守兴.罗红霉素含量的荷移光谱法测定[EB/OL].论文网，2011.6.
[2]秦永平，黄英，梁茂植等.血清中罗红霉素的反相高效液相色谱法测定[J].药物分析杂志，1997，17（4）：249.
[3]吴振洁，李敏伶，叶飞云.改变检测波长高效液相色谱法测定罗红霉素片的含量[J].中国抗生素杂志，1997，22（6）：187.