【摘 要】
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土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)是土槿皮(金钱松根皮)的主要生物活性成分,对多种人肿瘤细胞有细胞毒性作用.高内涵分析(high content analysis,HCA)是一种基于荧光显微
【机 构】
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北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,
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土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)是土槿皮(金钱松根皮)的主要生物活性成分,对多种人肿瘤细胞有细胞毒性作用.高内涵分析(high content analysis,HCA)是一种基于荧光显微技术的新技术,它以细胞为研究对象,可以同时对多个荧光靶点的荧光强度、分布,以及细胞形态进行自动化定量分析.利用高内涵分析、流式细胞术研究PAB对人乳腺癌MCF-7细胞抑制作用的机制.磺酰罗丹明实验显示,PAB抑制MCF-7细胞增殖,且呈现出剂量和时间依赖性,72 h IC50为(1.80±0.33)μmol/L.流式细胞术碘化丙锭(PI)单染显示PAB作用24 h,可致MCF-7细胞G2/M期比例增至93%以上,annexin V-FITC和PI双染显示PAB促进MCF-7细胞凋亡.高内涵分析显示:PAB作用16 h,MCF-7细胞有丝分裂指数可达40%左右,伴有cyclin B1含量增加;PAB促进微管解聚,干扰有丝分裂二极纺锤体形成;PAB引起线粒体增生;PAB导致"葡萄串样"细胞核形成,提示有丝分裂滑脱.结果表明,PAB抑制MCF-7细胞增殖、促进MCF-7细胞凋亡,这些作用可能与其促进微管蛋白解聚、干扰二极纺锤体形成、阻滞有丝分裂、促进线粒体增生有关.
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