【摘 要】
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目的:探讨NRF2通路与肝癌对索拉非尼耐药的机制。方法:采用浓度梯度递增法建立肝癌细胞系Hep G2和Huh7的耐药细胞株Hep G2-SR和Huh7-SR,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,验证细胞
【机 构】
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黑龙江省医学科学院,哈尔滨医科大学附属第四医院消化内科,哈尔滨医科大学附属第四医院肝胆外科
【基金项目】
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黑龙江省医学科学院科研计划项目(201502,201710);中国博士后科学基金面上项目(2016M591564);黑龙江省博士后资助经费(LBH-Z14219,LBH-Z16191);黑龙江省卫生厅课题(2014-399)
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目的:探讨NRF2通路与肝癌对索拉非尼耐药的机制。方法:采用浓度梯度递增法建立肝癌细胞系Hep G2和Huh7的耐药细胞株Hep G2-SR和Huh7-SR,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,验证细胞耐药特性。采用Western blot和实时定量PCR检测NRF2蛋白和mRNA的表达水平,验证索拉非尼对NRF2影响及调节水平。采用s i RNA阻断NRF2,验证对索拉非尼耐药的逆转作用。结果 :索拉非尼在Huh7及HepG2细胞促进细胞凋亡的作用明显强于Huh7-SR、HepG2-SR细胞(P<0.05)。耐药细胞株中NRF2蛋白的表达水平明显高于亲本细胞株(P<0.05),亲本细胞株中索拉非尼可上调NRF2蛋白的表达水平(P<0.05),但NRF2 mRNA表达差异无统计学意义(P<0.05)。采用si RNA阻断NRF2,可逆转肝癌对索拉非尼耐药,两者协同可促进细胞凋亡。结论:索拉非尼经转录后水平调解激活NRF2,诱导肝癌对索拉非尼耐药;而抑制NRF2可逆转肝癌对索拉非尼耐药。
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