水稻谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶的表达、纯化及晶体生长条件初筛

来源 :高等学校化学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dabing_12130

【摘要】

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将水稻PHGPx（OsPHGPx）的编码序列克隆到表达载体pGEX-6P-1上,并转化为大肠杆菌进行表达.通过GST亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析,制备了可用于晶体学研究的OsPHGPx,其纯

【作者】

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王丰刘进元

【机构】

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清华大学生物科学与技术系分子生物学实验室

【出处】

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高等学校化学学报

【发表日期】

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2007年9期

【关键词】

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水稻谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶表达纯化晶体生长三维结构建模 Oryza sativa Phospholipid hydroperoxide gluta

【基金项目】

：

国家“八六三”计划（批准号：2007AA100604）、国家重点基础研究发展计划（批准号：2006CB101706）、国家自然科学基金（批准号：30170080,39770078）和清华-裕元医学科学研究基金资助.

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将水稻PHGPx（OsPHGPx）的编码序列克隆到表达载体pGEX-6P-1上,并转化为大肠杆菌进行表达.通过GST亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析,制备了可用于晶体学研究的OsPHGPx,其纯度超过95%,具备明显的PHGPx活性.质谱显示OsPHGPx的精确分子量为19642.5553,与理论分子量基本一致.OsPHGPx在多个晶体生长条件下出现微晶.三维结构同源建模显示OsPHGPx的结构为硫氧还蛋白折叠形式.

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