【摘 要】
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目的:用巴氏毕赤酵母表达人源性抗角蛋白单链抗体.方法:从已构建好的质粒p3MH/ScFv中亚克隆目的片段ScFv并插入酵母表达载体pPIC9K,构建成重组质粒pPIC9K/ScFv,并测序鉴定.通
【机 构】
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广州军区广州总医院皮肤科,第四军医大学西京医院全军皮肤性病中心
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目的:用巴氏毕赤酵母表达人源性抗角蛋白单链抗体.方法:从已构建好的质粒p3MH/ScFv中亚克隆目的片段ScFv并插入酵母表达载体pPIC9K,构建成重组质粒pPIC9K/ScFv,并测序鉴定.通过电转将重组质粒pPIC9K/ScFv整合到巴氏毕赤酵母菌GS115的染色体上.经G418筛选得到高拷贝转化子及Mut表型鉴定后,用含0.5%甲醇的培养基诱导其分泌表达.结果:通过6天的诱导,该系统成功表达了抗角蛋白单链抗体,Western blot实验证实表达产物具有特异性.结论:获得了真核表达的抗角蛋白单链抗
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