近年来,由于抗生素滥用导致细菌产生耐药性的现象已经非常严重,而产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药菌株的出现,已成为目前出入境食品安全检测的重点和难点。耐药大肠埃希菌ESBLs基因型有5种,其中产CTX-M和TEM两种基因型最为普遍。为了加强对产CTX-M和TEM两种基因型ESBLs耐药大肠埃希菌的检测,本研究在反复优化的基础上,建立了针对产CTX-M和TEM两种基因型ESBLs大肠埃希菌的快速检测方法。针对CTX-M基因型的PCR方法检测CTX-M ESBLs型的灵敏度为10-5,针对TEM基因型的PCR方法检测TEM ESBLs型的灵敏度为10-4,双重PCR方法检测对应基因型ESBLs灵敏度均为10-4。该方法特异性好,尚未发现假阴性和假阳性现象。采用建立的方法与VITEK-2细菌鉴定系统的鉴定方法和NCCLSM100-S10推荐的检测方法同时对623份样品进行检测并比较,结果表明,共检出只含CTX-M型ESBLs的耐药菌株13株,检出只含TEM基因型ESBLs的耐药菌株1株,同时含有CTX-M和TEM两种基因型ESBLs的耐药菌株9株,检测结果与细菌分离鉴定结果一致。表明所建立的方法可为产ESBLs大肠埃希菌的快速准确检测提供有效的工具,能够满足产ESBLs大肠埃希菌快速、准确、有效的口岸检疫需求。