腺病毒介导自杀基因治疗胰腺癌实验研究(英文)

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目的 探讨腺病毒介导自杀基因联合前药 5FC对人胰腺癌的治疗作用。方法 构建含CD基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack CMV CD ,与骨架载体pAdEasy 1在细菌内同源重组为pAd CD ,经 2 93细胞包装、扩增 ,氯化铯密度梯度离心制备纯化高效的含绿色荧光蛋白greenfluorescentprotein (GFP)的CD腺病毒 ,体外转染人胰腺癌细胞Patu8988,并给予前药 5 FC ,观察其体外杀伤效果 ,Balb/c裸鼠皮下注射 1 0×10 7个人胰腺癌细胞Patu8988制成体内胰腺癌模型 ,待成瘤后 ,CD腺病毒直接注射至肿瘤 ,并腹腔给予 5FC。结果 含CD基因腺病毒载体经酶切鉴定正确 ,包装纯化后 ,检测病毒滴度为 2× 10 11pfu/ml,将重组腺病毒转染胰腺癌细胞株Patu8988后 ,可见 5FC对转染CD基因的Patu8988细胞及混育细胞有明显细胞毒性作用 ,而对未导入CD基因的人胰腺癌细胞毒性较低 ,在CD基因的原位转导的胰腺癌裸鼠移植瘤模型上亦可观察到抗肿瘤效应。结论 腺病毒介导CD基因 ,不仅转染效果强 ,而且可有效治疗胰腺癌。证实了酶解药物前体在实验性胰腺癌的治疗作用。
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