【摘 要】
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目的通过增加B细胞异位基因2(BTG2)蛋白表达水平的方法,抑制结肠癌细胞的增殖和转移。方法采用Western blot法检测正常人肠上皮细胞HIEC和结肠癌细胞SW620、HT–29、LS174T中BTG2蛋白的表达水平。采用免疫组织化学方法检测40例正常结肠上皮、40例结肠腺瘤和40例结肠癌组织中BTG2蛋白的表达情况。将含BTG2基因全长序列的质粒转染结肠癌SW620细胞,采用四甲基偶氮唑蓝
【机 构】
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目的通过增加B细胞异位基因2(BTG2)蛋白表达水平的方法,抑制结肠癌细胞的增殖和转移。
方法采用Western blot法检测正常人肠上皮细胞HIEC和结肠癌细胞SW620、HT–29、LS174T中BTG2蛋白的表达水平。采用免疫组织化学方法检测40例正常结肠上皮、40例结肠腺瘤和40例结肠癌组织中BTG2蛋白的表达情况。将含BTG2基因全长序列的质粒转染结肠癌SW620细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,免疫荧光方法检测Ki–67蛋白表达,划痕实验和Transwell双室培养体系检测结肠癌SW620细胞的迁移能力,鼠尾胶Matrigel 3D培养体系检测SW620细胞伪足生长情况。
结果Western blot检测结果显示,正常人肠上皮细胞HIEC、结肠癌细胞SW620、HT–29和LS174T中BTG2蛋白相对表达水平分别为0.83±0.12、0.18±0.04、0.20±0.05和0.36±0.07。免疫组织化学方法检测结果显示,BTG2蛋白在正常结肠组织、结肠腺瘤组织和结肠癌组织中的阳性表达率分别为82.5%(33/40)、77.5%(31/40)和17.5%(7/40),组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光方法检测结果显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组中Ki–67阳性率分别为(76.2±8.0)%、(81.4±9.7)%和(50.1±7.1)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组SW620细胞两侧间的距离分别为(79.27±11.24)μm、(80.65±12.17)μm和(124.77±19.63)μm,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组SW620细胞的迁移率分别为(78.5±13.1)%、(73.2±12.9)%和(47.4±9.1)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。经BTG2基因转染的SW620细胞克隆球伪足数量减少,延展性较差。
结论BTG2基因参与结肠癌细胞的增殖和转移,有效恢复BTG2蛋白功能,有望成为结肠癌基因治疗的方法选择之一。
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