【摘 要】
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目的评价Rho亚家族蛋白A/相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(RhoA/ROCK2)信号通路在异丙酚诱发新生大鼠海马神经元凋亡中的作用。方法实验Ⅰ 原代培养大鼠海马神经元，以1×106个/ml密度接种于6孔培养板中，采用随机数字表法分为2组(n＝6)：溶剂对照组(C组)和异丙酚组(P组)。P组加入异丙酚终浓度60 μg/ml；C组加入二甲基亚砜终浓度0.04%。于孵育24 h时，Western blot法
【机 构】
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目的评价Rho亚家族蛋白A/相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(RhoA/ROCK2)信号通路在异丙酚诱发新生大鼠海马神经元凋亡中的作用。
方法实验Ⅰ 原代培养大鼠海马神经元，以1×106个/ml密度接种于6孔培养板中，采用随机数字表法分为2组(n＝6)：溶剂对照组(C组)和异丙酚组(P组)。P组加入异丙酚终浓度60 μg/ml；C组加入二甲基亚砜终浓度0.04%。于孵育24 h时，Western blot法检测海马神经元RhoA和ROCK2的表达水平。实验Ⅱ 原代培养大鼠海马神经元，以1×106/ml的密度接种于6孔培养板中，采用随机数字表法分为3组(n＝6)：溶剂对照组(C组)、异丙酚组(P组)和异丙酚＋RhoA/ROCK2信号通路特异性阻断剂Y27632组(P＋Y组)。P组加入异丙酚终浓度60 μg/ml，P＋Y组加入终浓度为60 μg/ml的异丙酚和终浓度为10 μmol/L的Y27632，C组加入二甲基亚砜终浓度0.04%。于孵育24 h时，采用流式细胞术测定海马神经元凋亡率；采用Western blot法检测海马神经元活化的caspase-3的表达。
结果实验Ⅰ 与C组比较，P组海马神经元RhoA和ROCK2的表达上调(P<0.05)。实验Ⅱ 与C组比较，P组和P＋Y组海马神经元凋亡率升高，活化的caspase-3表达上调(P<0.05或0.01)；与P组比较，P＋Y组海马神经元凋亡率降低，活化的caspase-3表达下调(P<0.05)。
结论RhoA/ROCK2信号通路的激活参与了异丙酚诱发新生大鼠海马神经元凋亡的过程。
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