探讨RNA干扰(RNAi)抑制胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)基因对肾癌细胞活力和凋亡的影响及其机制。
方法以人胚肾HEK293细胞为对照组细胞,通过Western blot检测人肾癌786-0、A498、ACHN和CaKi-2细胞中IGF2BP1的蛋白表达。将设计并合成的IGF2BP1小干扰RNA(siRNA)经Lipofectamine™ 2000转染CaKi-2细胞,Western blot检测转染后的细胞中IGF2BP1、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键分子β-catenin及增殖凋亡相关靶基因增殖细胞核抗原(PCNA)、生存素(Survivin)的蛋白表达。
结果786-0(0.415±0.038)、A498(0.278±0.030)、ACHN(0.326±0.032)和CaKi-2(0.557±0.053)细胞中IGF2BP1的表达均明显高于在HEK293细胞(0.062±0.009)表达(P=0.003),选择CaKi-2细胞为研究对象。IGF2BP1 siRNA转染后的细胞中IGF2BP1(0.073±0.010)、β-catenin(0.178±0.021)、PCNA(0.147±0.016)、Survivin(0.095±0.010)的蛋白表达均明显低于NC组(0.485±0.055)、(0.547±0.050)、(0.246±0.028)、(0.168±0.018),细胞活力(0.557±0.045)明显低于NC组(0.804±0.057,细胞凋亡率(21.48±1.54)%明显高于NC组(2.46±0.27)%,差异均有统计学意义(P=0.000)。
结论IGF2BP1在肾癌细胞表达升高,抑制其表达后可明显降低细胞活力和诱导凋亡,机制可能是Wnt/β-catenin信号通路的降低。