硫化氢在肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障功能障碍中的作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lintso1101
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目的 观察硫化氢(H_2S)在肠缺血.再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障功能障碍中的作用.方法 雄性Wistar大鼠24只,分为S(假手术)组、Ⅰ(缺血-再灌注)组,N(缺血-再灌注+NaHS)组(n=8),N组在再灌注前10 min静脉注射100 μmol/kg NaHs后按每小时1 mg/kg持续静脉注射直到再灌注2 h,S和Ⅰ组静脉注射相同体积的生理盐水.采用改良的酶学分光光度法测定血浆D-乳酸水平,采用分光光度法检测小肠黏膜超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XO)水平,敏感硫电极法检测硫化氢(H_2S)浓度.电镜下观察肠黏膜形态学改变,TUNEL染色观察小肠上皮细胞凋亡指数(AI),逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小肠黏膜组织胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、胱硫醚-β-合酶(CBS)、多聚ADP核糖合成酶(PARP)和细胞凋亡蛋白酶(Caspase)-3 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测小肠黏膜PARP和Caspase-3蛋白水平.结果 N组D-乳酸含量、AI分别为(2.35±0.26)mg/L、(24.41±2.76)%,低于Ⅰ组、高于S组(P
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