【摘 要】
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目的 研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度(IC50)确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组(0μmol/L)、低浓度组(5μmol/L)、中浓度组(10μmol/L)、高浓度组(20μmol/L)。以平板克隆实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测安罗替尼对SiH
【基金项目】
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国家自然科学基金(81472431); 江苏省医学重点人才基金(ZDRCA2016072); 南京中医药大学自然科学基金(XZR2020070);
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目的 研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度(IC50)确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组(0μmol/L)、低浓度组(5μmol/L)、中浓度组(10μmol/L)、高浓度组(20μmol/L)。以平板克隆实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测安罗替尼对SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。以Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、上皮钙黏附素(E-cadherin)、无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果 CCK-8实验显示安罗替尼能够剂量依赖性抑制SiHa细胞的增殖,作用24、48和72 h的IC50分别为(26.96±2.25)、(13.59±1.13)和(9.27±0.75)μmol/L。平板克隆实验显示,处理SiHa细胞48 h后,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞克隆形成率分别为(62.05±7.88)%、(39.96±5.10)%、(24.02±4.98)%和(15.14±3.03)%。与对照组相比,低、中、高浓度组SiHa细胞克隆率显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。随着药物剂量的增加,SiHa细胞克隆率也逐渐减小,具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,对照组、低浓度组、中浓度组细胞迁移率分别为(72.03±5.40)%、(56.98±6.55)%和(41.33±7.02)%。与对照组相比,低浓度组、中浓度组SiHa细胞迁移率显著下降,差异均有统计学意义(P均<0.05),随着药物剂量的增加,SiHa细胞迁移率也逐渐减小,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell细胞侵袭实验结果显示,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组侵袭细胞数分别为(180±10)、(125±10)、(78±8)和(30±5)个,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的E-cadherin蛋白表达升高,VEGF、MMP-9、Wnt1和β-catenin的蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 安罗替尼可能通过Wnt/β-catenin通路发挥抑制SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的作用。
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