【摘 要】
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为建立一种可检测血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)的实时定量PCR方法,根据Gen Bank中DHAV-1 5’非编码区的保守区,设计合成1对引物和1条Taq Man探针,以构建的重组质粒作为标准
【机 构】
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武汉中博生物股份有限公司; 上海创宏生物科技有限公司;
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为建立一种可检测血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)的实时定量PCR方法,根据Gen Bank中DHAV-1 5’非编码区的保守区,设计合成1对引物和1条Taq Man探针,以构建的重组质粒作为标准品,绘制标准曲线,并对所建立方法进行了特异性、敏感性和可重复性试验以及临床病料检测初步应用。结果,该方法与血清3型鸭甲型肝炎病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒等无交叉反应性;最低可以检测到10 copies/μL;组内和组间变异系数均小于3%;临床病料的检测结果与测序检测结果一致。结果表明,所建立的实时定量检测方法具有特异、敏感、稳定等优点,可用于DHAV-1的快速检测与定量分析。
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