【摘 要】
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目的了解抑制神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）荷瘤小鼠体内髓系抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cell，MDSC）对趋化因子12（cxc chemokine receptor ligand 12，CXCL12）及趋化因子受体4（cxc chemokine receptor type 4，CXCR4）表达影响及其在免疫治疗中的作用，探索控制NB生长和转
【机 构】
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目的了解抑制神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）荷瘤小鼠体内髓系抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cell，MDSC）对趋化因子12（cxc chemokine receptor ligand 12，CXCL12）及趋化因子受体4（cxc chemokine receptor type 4，CXCR4）表达影响及其在免疫治疗中的作用，探索控制NB生长和转移的新方法。
方法采用SK-N-SH细胞接种法建立神经母细胞瘤BALB/c荷瘤小鼠模型，成瘤后切取标本，HE染色观察肿瘤组织结构。将荷瘤小鼠按随机数字表法分为对照组、生理盐水（NS）组、多柔比星（doxorubicin，DOX）2.5 mg/kg组、DOX 5 mg/kg组和多巴胺（dopamine，DA）50 mg/kg组，每组30例。在肿瘤细胞接种后7 d和12 d，分别按相应剂量对各组实施NS、DOX或DA鼠尾静脉注射，对照组不实施任何干预。于接种后14、17、23 d，分离检测，对比各组小鼠脾脏、骨髓和肿瘤中MDSC数量比例和凋亡率；比较各组肿瘤生长曲线有无差异。同期采用免疫组织化学（MaxVision）法检测对比各组瘤体、瘤旁、瘤远及瘤旁淋巴结组织中CXCL12及CXCR4表达。对各组肿瘤大小、瘤体MDSC比例与CXCL12/CXCR4表达进行相关性分析。制备肿瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL），实施荷瘤小鼠免疫治疗对比实验。荷瘤小鼠按随机数字表法分为对照组、DOX2.5 mg/kg组、CTL组、DOX2.5 mg/kg+CTL组，每组30例。比较各组肿瘤生长曲线有无差异。采用SPSS22.0软件进行统计学处理。
结果各用药组在肿瘤、骨髓和脾脏组织中MDSC比例均受到不同程度抑制，依次为DOX2.5组>DOX5组>DA组>对照组（P<0.05）。但各组织在不同药物刺激下MDSC凋亡率均无统计学意义（P>0.05）。各组肿瘤生长曲线比较可见DOX2.5组和其他各组间均存在统计学意义（P=0.000）。瘤体、瘤旁和淋巴组织中CXCL12和CXCR4表达较瘤远组织为高，以瘤体中表达最高。不同用药组瘤体中CXCL12和CXCR4表达均受到抑制，以DOX2.5组受抑最为显著（P=0.018,P=0.000）。各组肿瘤体积和MDSC比例、CXCL12/CXCR4均存在正相关（rs=0.904；rs=0.907；rs=0.579）。不同免疫治疗组肿瘤体积比较，除CTL组和DOX2.5组之间差异无统计学意义外，其他各组间差异均存在统计学意义。
结论小剂量DOX应用可有效抑制NB荷瘤小鼠体内MDSC，继而同步抑制CXCL12及其受体CXCR4表达，提高效应细胞杀伤效果，有效控制肿瘤生长和转移。
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