甘蓝型油菜显性核不育全不育系高纯度制种技术分析

来源 :分子植物育种 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yannini01
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本研究开展了甘蓝型油菜显性核不育全不育系高纯度制种技术的研究,利用离体培养、无性扩繁和BE10分子标记辅助选择等技术繁殖纯合型不育株.结果表明,利用幼嫩枝条诱导获得试管苗不容易出现混杂,基因型鉴定更为简单、准确.通过对试管苗移栽技术的研究发现,培养土移栽试管苗可有效提高成活率,两次移栽的最佳时期为9月底至10月初.与原有产量585 kg/hm2相比,利用显性核不育无性扩繁技术生产全不育系产量为827kg/hm2,比原有产量提高了 40%,田间育性鉴定结果显示全不育系纯度可达99%以上,为进一步推动甘蓝型油菜显性核不育系的应用奠定技术基础.
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为利用分子标记辅助育种技术更好地保护高粱的种质资源,本试验构建了高粱SCoT-PCR的最佳反应体系.试验采用单因素实验设计的方法对影响高粱SCoT-PCR反应体系的5个因素,即dNTP用量、DNA的用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度分别进行梯度设计优化分析,并对得到的最佳体系进行验证.综合单因素试验结果,明确在高粱SCoT-PCR 25 μL反应体系中,最佳反应体系为:引物2.0 μL,DNA 1.25 μL,dNTP 1.0 μL,Taq DNA聚合酶0.2 μL,Mg2+ 2.0
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为筛选芒果细菌性角斑病菌在侵染芒果叶片过程中稳定表达的内参基因,采用实时荧光定量聚合酶链式扩增反应技术检测和分析病原细菌的16S rRNA、gyrB、GAPDH、danK和rpoD这5个看家基因的表达量.结果 表明,经过PCR扩增效率筛选,5个基因均扩增出单一条带,且条带大小与预期产物相符,特异性较好,符合基本稳定性要求.利用geNorm软件分析发现,GAPDH和rpoD稳定性最高,M值均为0.122.其余3个基因的表达稳定性依次为gyrB (M=0.17)>danK (M=0.325)> 16S rRN
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本实验以高糖自交系西州蜜(X25)和低糖自交系伽师瓜(JS)为亲本构建F2群体XJ F2,以高糖品种网纹甜瓜M157自交系和低糖自交系伽师瓜(JS)为亲本构建F2群体MJ F2.通过分析两个群体的果实糖度频率分布,发现两个群体的果实糖度均呈正态分布,符合数量性状遗传的典型特征.利用SSR标记通过集群分离分析法对糖含量性状相关的基因进行初步定位,发现XJ F2群体中具有3个SSR标记ECM134 (LG4),MU3349 (LG11)和CMAGN45 (LG11)与甜瓜果实的糖含量性状连锁,并在MJ F2群
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