【摘 要】
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目的 增强HBV慢性感染时T细胞的功能,成为HBV感染研究的热点和关键.本研究分析HBV感染后,核苷酸内焦磷酸酶2/溶血磷脂酸轴与病毒载量、病毒特异的CD4+T细胞和CD8+T细胞之间的相关性,探讨核苷酸内焦磷酸酶2/溶血磷脂酸轴参与调节细胞免疫的机制.方法 用pcDNA3.1-HBV1.3质粒瞬时转染HepG2和Huh-7细胞,在细胞水平上验证ENPP2(核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶2)蛋白与病
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学教育部感染病学分子生物学重点实验室 400010
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目的 增强HBV慢性感染时T细胞的功能,成为HBV感染研究的热点和关键.本研究分析HBV感染后,核苷酸内焦磷酸酶2/溶血磷脂酸轴与病毒载量、病毒特异的CD4+T细胞和CD8+T细胞之间的相关性,探讨核苷酸内焦磷酸酶2/溶血磷脂酸轴参与调节细胞免疫的机制.方法 用pcDNA3.1-HBV1.3质粒瞬时转染HepG2和Huh-7细胞,在细胞水平上验证ENPP2(核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶2)蛋白与病毒复制的关系;用免疫组织化学法检测ENPP2在健康人、乙肝患者组织中的表达,在组织水平验证目标蛋白与病毒的关系;用酶联免疫吸附法检测健康人、未治疗乙肝患者血循环中目标蛋白的表达情况,用流式细胞术检测T淋巴细胞变化,并分析目标蛋白与病毒载量的相关性、目标蛋白和机体免疫的关系;用细胞生物学技术分析ENPP2/LPA轴与淋巴细胞之间的相互作用.结果 ENPP2在HepG2和Huh-7细胞感染HBV的状态下表达上调约2倍(P< 0.05);它在乙肝患者组织中也呈现上调趋势;血循环中,乙肝患者的ENPP2表达水平高于健康人2.32倍(P< 0.05),其中乙肝患者的ENPP2水平与病毒载量呈现负相关关系(r=-0.263,P< 0.05),与活化的T淋巴细胞成正相关关系(P<0.05);细胞生物学实验结果显示,ENPP2/LPA可促进淋巴细胞归巢、再分布,并促进T淋巴细胞活化.结论 ENPP2是宿主感染HBV后应答上调的分泌蛋白,ENPP2/LPA效应轴参与了机体的细胞免疫过程,对持续的免疫应答发挥了作用.
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