可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究

来源 :2006年全国生化与生物技术药物学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong441
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目的:制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究.方法:将木瓜蛋白酶偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶.并测定游离和水溶性固定化木瓜蛋白酶最适作用pH值、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性.结果:游离和可溶性固定化木瓜蛋白酶的最适作用pH值分别为6.0和5.0,最适作用温度分别为60℃和70℃,Km值分别为2.53 mg·ml-1和3.07 mg·ml-1;可溶性固定化木瓜蛋白酶在60℃条件下,保温12h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30d后活性保留达90%以上;在pH6.0时稳定性最好,在pH4.0-7.0范围内也比较稳定(相对活性>80%).结论:可溶性固定化木瓜蛋白酶能够在pH5.5以上的溶液中完全溶解,最适作用pH值范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热稳定性和酸碱稳定性均明显增强.
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