【摘 要】
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[目的]建立并比较体外光毒性的3T3 NRU方法与鸡胚光毒性试验方法,并应用于原料和产品的测试,为建立光毒性体外测试组合奠定基础.[材料与方法]参考OECD432指南,3T3成纤维细胞中性红摄取光毒性试验(3T3 NRU-PT)是对加有不同浓度受试物的BALB/c 3T3细胞在96孔板中孵育1h,然后暴露在UVA(剂量为1.67mW/cm2)50min,24h后测试中性红在540nm处的光密度值(
【机 构】
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中山大学公共卫生学院,广州510000 广东出入境检验检疫技术中心,广州510000
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]建立并比较体外光毒性的3T3 NRU方法与鸡胚光毒性试验方法,并应用于原料和产品的测试,为建立光毒性体外测试组合奠定基础.[材料与方法]参考OECD432指南,3T3成纤维细胞中性红摄取光毒性试验(3T3 NRU-PT)是对加有不同浓度受试物的BALB/c 3T3细胞在96孔板中孵育1h,然后暴露在UVA(剂量为1.67mW/cm2)50min,24h后测试中性红在540nm处的光密度值(OD).通过比较有光照和无光照条件下的细胞毒性,计算受试物的IC50、光刺激因子(PIF)和平均光效应(MPE).HET-PT方法是购买SPF级鸡胚,加入不同浓度受试物或单一浓度配方后,暴露在UVA下(剂量为50～1000 mJ/cm2),后孵育24h后测试鸡胚反应.通过比较有光照和无光照条件下的鸡胚血管反应,计算体外评分.选择10种已知光毒性化学物质测试,建立预测模型.将两种方法用于17种防晒产品(10种原料和7种产品)的光毒性测试,确定其在检测防晒产品安全性中的适用性和组合模式.[结果]3T3NRU-PT方法和HET-PT方法对10种已知光毒性(7种阳性,3种阴性)的化学物质测试结果表明均实现正确分类.两种方法对于17种未知光毒性的防晒产品的实验结果表明,3T3NRU-PT方法对4种不可溶解物质的测试无法获得结果,对13种可溶解物质的测试为10种阴性、3种阳性.HET-PT方法不受剂型和溶解性影响,17种产品的预测结果为14种阴性,3种阳性.全部样品经动物光毒性试验证实为14种为阴性、3种为阴性.[结论]本实验室建立了3T3NRU-PT与HET-PT两种光毒性替代方法,可实现完全替代光毒性的动物测试,并解决了细胞光毒性试验不适用于成品评价的难题,初步结论为可溶解原料的测试首选符合OECD标准的3T3 NRU-PT法,难溶解或成品的测试选择HET-PT法.
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