【摘 要】
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本研究利用PCR和RACE技术从银杏叶中克隆了GbWD40的cDNA和基因组全长序列,该基因ORF区大小1017 bp,无内含子.实时定量PCR分析表明,GbWD40基因在银杏叶、雄花和幼果中的表达量较高,在茎中的表达量较少,在根中几乎不表达；在银杏叶不同生长时期的转录表达量与银杏叶中类黄酮含量呈现显著正相关,表明GbWD40可能参与调控银杏叶中类黄酮含量的积累.GbWD40重组蛋白能在大肠杆菌中
【机 构】
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长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025 武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023
【出 处】
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第六届全国果树分子生物学学术研讨会
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本研究利用PCR和RACE技术从银杏叶中克隆了GbWD40的cDNA和基因组全长序列,该基因ORF区大小1017 bp,无内含子.实时定量PCR分析表明,GbWD40基因在银杏叶、雄花和幼果中的表达量较高,在茎中的表达量较少,在根中几乎不表达；在银杏叶不同生长时期的转录表达量与银杏叶中类黄酮含量呈现显著正相关,表明GbWD40可能参与调控银杏叶中类黄酮含量的积累.GbWD40重组蛋白能在大肠杆菌中正确表达,亚细胞定位分析发现GbWD40基因主要在细胞核内表达.转基因研究发现,GbWD40基因在烟草中可显著提高其类黄酮含量和花青素含量,HPLC分析显示,山奈酚类、槲皮素类物质在转基因烟草中含量分别是对照组的1.35和1.73倍.Real-time PCR分析表明,转基因烟草中GbWD40基因表达量与NtANS、NtCHI、NtCHS、NtDFR、NtF3H、NtFLS、NtUFGT的基因表达量均有显著提高,且呈现正相关.GbWD40基因转入银杏胚,在诱导的转基因愈伤中可以显著提高其类黄酮,特别是花青素的含量.这些结果表明,GbWD40可能与类黄酮、花青素代谢途径的关键酶一起作用,参与调控类黄酮、花青素代谢产物的积累.
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