表达在HEK293细胞上的BKCa通道基本特性与动力学调控研究

来源 :2012中国生理学会心血管生理学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jweblogicdownload
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的:构建稳定表达人血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)的293细胞系,同时研究其基本电生理学特征和动力学模型.方法:通过脂质体(lipofectamine 2000)转染法转染BKCa表达质粒pcDNA3.1-BKα和/或pIRES-BKβ1,筛选稳定表达的单克隆细胞系.使用膜片钳多种记录方式研究其基本电生理学特性,同时建立BKCa动力学研究模型.结果:(1)构建稳定转染BKCa通道α和/或β1亚单位的HEK293细胞系通过膜片钳能够记录到具有与天然细胞BKCa电生理学特性相似的电流,包括大电导特性(内面向外式构型下单通道电导为206.5±5.0pS),电压依赖性,钙离子依赖性,钾离子选择性和200nM IbTX(BKCa特异性阻断剂)阻断;联合表达β1亚单位能够明显增加通道的开放时程.(2)采用inside-out宏观电流记录方式可以记录到明显的尾电流.可以用于分析通道激活、去激活等动力学模型及药物动力学作用机制.结论:成功构建稳定转染BKCa通道α和/或β1亚单位的HEK293细胞系.膜片钳实验证明具有典型的BKCa电生理学特性,同时建立的细胞系可以很好的用于BKCa通道功能调控研究和动力学参数分析.
其他文献
还把那些数码产品捂在被窝中或办公室的抽屉里吗?现代数码生活提倡的是在户外发光发热,该把那一票数码产品拿出来晒晒太阳了。想知道我们是怎样做的吗?Follow me。 2005年7
一、信贷资产保全面临的难点当前信贷资产保全方面存在的难点主要有:1、信贷资产整体状况欠佳。从河南省贷款五级分类情况看,不良贷款(次级、可疑、损失贷款)占比较高,信贷
会议
今年,广州港建港工程在3月底验收新沙6~10号泊位水工工程和新港11万伏变电站工程的基础上,以下三大项目也计划于年底前竣工。 This year, on the basis of acceptance of th
老年人饮食,除了要选择适宜老年人的食谱外,还应注意进食的科学性。在进食时,切莫忽视以下“四度”: 速度 古代医书《医说》中有云:“食不欲急,急则损脾,法当熟嚼令细。”进
会议
从字面上看,“凌日”与“日凌”是两个相同汉字的正反排列,而实际上它们却是两种很不相同的科学现象.
面对不景气的水运市场,许多水运企业步履艰难,如何在竞争中树立良好的声誉,赢得市场,保障企业效益?确保安全,是水运企业在市场中的立足之本。根据新形势和安全生产的客观规