【摘 要】
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目的 氢醌可以抑制K562细胞红系分化,也可引起活性氧(ROS)的产生,实验观察了ROS的产生在氢醌抑制K562细胞红系分化中的作用.方法 K562细胞经氢醌单独或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)共同24 h处理后,用DCFDA作为探针应用流式细胞术分析K562细胞的细胞内ROS水平,分别用联苯胺染色法和反转录PCR分析氯化高铁血红素诱导的受氢醌与NAC处理的K562细胞的血红蛋白阳性率和γ-珠
【机 构】
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北京航空航天大学生物与医学工程学院,北京100191
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目的 氢醌可以抑制K562细胞红系分化,也可引起活性氧(ROS)的产生,实验观察了ROS的产生在氢醌抑制K562细胞红系分化中的作用.方法 K562细胞经氢醌单独或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)共同24 h处理后,用DCFDA作为探针应用流式细胞术分析K562细胞的细胞内ROS水平,分别用联苯胺染色法和反转录PCR分析氯化高铁血红素诱导的受氢醌与NAC处理的K562细胞的血红蛋白阳性率和γ-珠蛋白基因的mRNA表达水平.结果 K562细胞经氢醌5,10和20 μmol· L-1处理24 h,然后经氯化高铁血红素诱导红系分化48 h后,其血红蛋白阳性率从对照组的41.0％分别下降到39.6％,35.8％和32.7％.相对于没有经氯化高铁血红素诱导的K562细胞,被氯化高铁血红素诱导的对照细胞的γ-珠蛋白基因mRNA表达水平提高了3.1倍,而经氢醌5,10和20μmol· L-1处理24 h的K562细胞在被氯化高铁血红素诱导的情况下γ-珠蛋白基因mRNA表达水平分别只提高了2.1,1.5和0.6倍.K562细胞经氢醌5,10和20 μmol·L-1处理24 h后细胞内ROS水平出现浓度依赖性增加,而同时加入NAC可完全抑制ROS水平的提高.如果K562细胞经20 μmol·L-1氢醌和NAC 10 mmol· L-1同时处理24 h,NAC的存在可完全阻断氢醌抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成和γ-珠蛋白基因的mRNA表达.结论 氢醌可抑制K562细胞的红系分化和提高细胞内ROS水平,而抗氧化剂NAC存在可阻断红系分化的抑制和细胞内ROS水平的提高,提示ROS在氢醌抑制红系分化中发挥重要作用.
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