【摘 要】
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囊性纤维化跨膜转导调节因子(Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是上皮细胞膜上一种转导氯离子的离子通道,其基因突变可导致上皮细胞液体运输
【机 构】
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浙江省医学科学院,浙江,杭州310013
【出 处】
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2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会
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囊性纤维化跨膜转导调节因子(Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是上皮细胞膜上一种转导氯离子的离子通道,其基因突变可导致上皮细胞液体运输失调及囊性纤维化(Cystic Fibrosis,CF),引起呼吸系统疾病表现为肺部感染、肺组织纤维化、阻塞性肺疾病；消化系统疾病表现为急慢性胰腺炎、胰功能不全、胆汁性肝硬化；生殖系统疾病表现为不孕不育,男性先天性单侧或双侧输精管缺如、精子获能障碍、精子质量低下,女性生殖道中精子获能障碍,胚胎着床失败、沙眼衣原体感染等.因此,CFTR蛋白对于维持人类正常生理功能至关重要,其蛋白可作为CF的诊断标志物.CFTR基因突变或多态性可改变蛋白结构,影响针对单一表位抗体的免疫学分析有效性；同时CFTR表位相关的自身免疫机制尚不清楚.本研究首次制备了包含3个CFTR肽段的重组蛋白(r-CFTR-3P)抗血清,并利用生物合成肽策略对其表位进行了鉴定.r-CFTR-3P基因被克隆到pSY621表达质粒；r-CFTR-3P蛋白在大肠杆菌BL21菌株中表达；然后用纯化的r-CFTR-3P蛋白免疫新西兰白兔,获得r-CFTR-3P抗血清.r-CFTR-3P抗血清可识别人精子中天然CFTR和与GST188融合的CFTR25-36、CFTR103-117、CFTR1387-1480三个不同肽段；四个r-CFTR-3P的B细胞抗原表位被鉴定,即CFTR蛋白的29RQRLEL34,104RIIASY109,111PDN113以及1447VKLF1450；用NCBI BLAST比对发现,所鉴定的抗原表位与其他多种物种蛋白具有同源性.本研究为CFTR蛋白检测提供了新的工具,有助于理解CFTR的B细胞表位特点及相关免疫学机制.
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